INVESTIGADORES
COVACEVICH Fernanda
informe técnico
Título:
Informe Final (STAN ST4950) para Nemaste. Determinacion de hongos micorricicos en muestras
Autor/es:
COVACEVICH, F
Fecha inicio/fin:
2022-10-17/2022-12-01
Páginas:
1-15
Naturaleza de la
Producción Tecnológica:
Biológica
Campo de Aplicación:
Produccion vegetal
Descripción:
Se recibieron DOS muestras en envases cerrados correspondiente a producto Az.brasilense+G.intraradices L12998 y producto Amazonia L326, ambos granulados, que fueron proporcionadas por la Empresa Nemaste Evaluaciones solicitadas y realizadas. Resultados obtenidos1)Recuperación y recuento de esporas totales: Se procesaron las muestras (6 alícuotas de 5 g cada una que fueron procesadas de manera independiente) para la extracción de esporas de HMA mediante la técnica de tamizado en húmedo, decantado y centrifugación en gradiente de sacarosa al 60%, 2)Determinación de la viabilidad de esporas: esta actividad no pudo realizarse debido a que no se recuperaron esporas del material enviado para evaluación.En reemplazo, se realizó un ensayo de detección de infección (no presupuestado)Se realizaron 3 repeticiones de los siguientes Tratamientos: -No inoculado, -Inoculado con Az.brasilense+G.intraradices L12998, -Amazonia L326, -No inoculado creciendo en suelo no estéril-3) Determinación de presencia de propagulos de hongos micorrícicos por técnicas moleculares: -Aun habiéndose registrado ausencia de esporas en los productos evaluados, considerando que se podría contar con presencia de otros propágulos (hifas) que por el material acompañante pudieran ser de difícil visualización en los productos, se realizó la actividad propuesta.Actividades realizadas: A partir de 1 g de cada producto enviado se realizó -Extracción de DNA a partir del material proporcionado por la empresa utilizando el kit comercial de extracción de DNA de Qiagen (Imagen 5). Observación de la integridad y estimación de la abundancia del DNA extraído a través de electroforesis en gel de agarosa 1% Amplificación por la reacción en cadena de la Polimerasa (PCR) a través de una estrategia anidada (dos reacciones de PCR consecutivas) parte de la ribosomal mayor del LSUrDNA de Hongos generales, y de hongos micorrícicos arbusculares glomoides. Observación de la presencia y tamaño de amplicones esperados a través de electroforesis en gel de agarosa 1%
