Biodiversidad de la fracción más pequeña del fitoplancton (pico fitoplancton) del mar argentino

COVACEVICH F; PEREZ CENCI M; SILVA R; NEGRI R; SALERNO G

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Congreso; II Congreso Nacional de Conservación de la Biodiversidad; 2006

Univ Maimónides, Fund Historia Natural Félix de Azara, Fund Temaikèn, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales (UBA)

El objetivo ha sido caracterizar la biodiversidad en las fracciones más pequeñas del fitoplancton (organismos picoplanctónicos < 2 µm) del Mar Argentino mediante la aplicación de técnicas genético-moleculares. Asimismo, es de interés conocer la variación estacional de estos organismos y que factores podrían afectarla. Se han colectado mensualmente muestras de agua superficial durante campañas oceanográficas en una Estación Permanente de Estudios Ambientales (EPEA) frente a las costas de Mar del Plata. Asimismo, se han realizado campañas estacionales de recolección de muestras a lo largo de la plataforma y el talud patagónico. Las muestras fueron filtradas y se realizó la extracción del ADN genómico ambiental. Posteriormente se procedió a la amplificación por PCR del gen 18S ADNr. Los productos de amplificación purificados fueron clonados y se generaron bibliotecas genómicas en Escherichia coli. Los clones con distinto patrón genético evidenciado por RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism) fueron secuenciados y se evaluaron las relaciones filogenéticas comparando las secuencias obtenidas  con otras presentes en bases de datos públicas. Paralelamente, se evaluó la variación anual de la biodiversidad por la metodología de DGGE (Denaturing Gradient Gel Electrophoresis). Para ello, las muestras de un año de relevamiento fueron amplificadas por PCR obteniéndose fragmentos de ADN que se separaron por electroforesis en geles de poliacrilamida con gradientes desnaturalizantes que permiten diferenciar fragmentos que difieren en pocas bases. Las imágenes digitales de los geles de DGGE fueron  analizadas mediante softwares especializados, se construyeron matrices donde se registraron posición y densidad de cada banda del gel de DGGE. Esto permitió calcular los índices de diversidad (Shannon y Simpson) así como la construcción de dendrogramas. Nuestro primer resultado relevante fue la identificación molecular en muestras ambientales de un organismo eucariota fotosintético que había sido previamente aislado y mantenido en cultivo. El estudio filogenético de la secuencia completa del gen 18S rDNA ha revelado que dicho organismo pertenece a las Prasinofíceas del clado VII, y es dominante en aguas costeras de Mar del Plata durante verano y otoño. Dicho organismo también ha sido identificado molecularmente en las aguas de Península de Valdés durante primavera. El análisis del patrón de diversidad anual mediante geles de DGGE reveló que los mayores índices de diversidad picoplanctónica en las zonas costeras de Mar del Plata se registraron a fines de invierno y durante todo el período de primavera. El estudio de muestras ambientales extraídas durante los meses de primavera de zonas costeras de Mar del Plata reveló la presencia de organismos pertenecientes a diversos grupos de eucariotas fotosintéticos tales como Stramenópilos, Dinofíceas, Dictiofíceas y Eucariotas Marinos No Cultivados. Asimismo, en zonas costeras de la Península de  Valdés durante primavera las secuencias obtenidas evidenciaron la presencia de organismos eucariotas marinos, principalmente fotosintéticos, pertenecientes a: Alveolados, Chlorofitas, Cryptofitas, Haptofitas, Stramenópilos y Eucariotas Marinos No Cultivados. Algunas de estas secuencias se corresponden con nuevos grupos de Alveolados y Stramenopilos recientemente identificados en otras áreas de Europa. Estos resultados constituyen los primeros aportes al conocimiento de la diversidad de los componentes más pequeños del plancton en esta región.