Mecanismo de fototrasducción en células ganglionares de la retina de pollo.

CONTIN MARIA ANA; GUIDO MARIO EDUARDO

Villa Giardino, Códoba Argentina

Jornada; Sociedad de Biologia de Córdoba; 2005

Sociedad de Biologia de Cordoba

MECANISMO DE FOTOTRANSDUCCIÓN EN CÉLULAS GANGLIONARES DE LA RETINA. Contín, M A. y Guido, M E. CIQUIBIC (CONICET) ? Depto. de Química Biológica, Fac. de Cs Químicas, UNC- Córdoba. mcontin@mail.fcq.unc.edu.ar Recientemente se ha descubierto que conos y bastones no son las únicas células fotorreceptoras en la retina; una subpoblación de células ganglionares (RGCs) son también intrínsecamente fotosensibles y se depolarizan en respuesta a la luz. Dichas células proyectan axones al núcleo supraquiasmático y otros núcleos del SNC que tienen como función la regulación fótica no-visual del sistema circadiano; ej. la regulación del reflejo pupilar, y la síntesis de melatonina. Si bien, nada se conoce sobre el mecanismo bioquímico de fototransducción de las RGCs, se ha demostrado que dichas células expresan melanopsina, un fotopigmento putativo con similitud a las opsinas de invertebrados, la cual sería la encargada de conferir la sensibilidad a la luz a las RGCs. Objetivo dilucidar el mecanismo de fototransducción en RGC. Se realizaron cultivos primarios de RGCs a partir de embriones de pollo de 7 días; se los sincronizó por períodos de luz-oscuridad (12:12 hs) durante 4 días. Al quito día midió la síntesis de melatonina a diferentes tiempos realizando pulsos de marcación con L-[5-3H]-tryptophan de 4 horas. La 3H- melatonina se separó de otros compuestos por TLC y se cuantificó. Para dilucidar componentes de la vía de fototransducción, durante el pulso con L-[5-3H]-tryptophan se incubaron las células con activadores (SNP, zaprinast y forskolina) o inhibidores (Neomicina, BAPTA) de la vía de fototransducción. Además se cuantificó GMPc (un componente clave de la fototransducción). Resultados: Las RGCs sintetizan melatonina de manera circadiana con dos picos máximos de síntesis (ZT-8 y ZT-20). Los niveles de 3H- melatonina decrecen significativamente en cultivos expuesto a la luz respecto a los mantenidos en oscuridad durante horarios diurnos. La síntesis de melatonina parece ser regulada por componentes de la vía de fototransducción de invertebrados ya ésta fue inhibida por activadores y activada por inhibidores de la vía.