Desarrollo embrionario de la retina de pollo. Ontogenia de factores de transcripci¨®n, opsinas, y factores regulatorios de las cascadas de fototransducci¨®n

VERRA DANIELA MARIANA; CONTIN MARIA ANA; GUIDO MARIO E

Facultad de Ciencias quimicas Universidad Nacional de Cordoba. Argentina

Congreso; V CONGRESO NACIONAL DE INVESTIGACIÓN EN VISIÓN Y OFTALMOLOGÍA.; 2008

Asociacion para la Investigacion en Vision y Oftalmologica (AIVO)

Desarrollo embrionario de la retina de pollo. Ontogenia de factores de transcripci¨®n, opsinas, y factores regulatorios de las cascadas de fototransducci¨®n Verra, DM; Cont¨ªn MA; Guido ME. Dpto. Qu¨ªmica. Biol¨®gica-CIQUIBIC- Fac. Cs. Qcas.- Universidad Nacional de C¨®rdoba- mail: dverra@mail.fcq.unc.edu.ar Introducci¨®n: La fotopercepci¨®n no visual en la retina, es llevada a cabo por una subpoblaci¨®n intr¨ªnsecamente fotosensible  de las C¨¦lulas Ganglionares de la Retina  (CGRif). Estas c¨¦lulas expresan el fotopigmento Melanopsina, y presentan caracter¨ªsticas comunes con los fotorreceptores rabdom¨¦ricos, presentes en invertebrados. Los fotorreceptores rabdom¨¦ricos presentan fuertes diferencias con los fotorreceptores ciliados (conos y bastones), a nivel de especializaci¨®n de membrana, cascadas de fototransducci¨®n, etc (Arendt D, 2003). Resultados de nuestro laboratorio indican que las CGRs de pollo son fotosensibles actuando a trav¨¦s de una cascada de fototransducci¨®n  similar a la presente en invertebrados. (Cont¨ªn et al., 2006).  Objetivos: investigar la expresi¨®n de diversos ARNm involucrados en especificaci¨®n (factores de transcripci¨®n), mecanismos de fototransducci¨®n de invertebrados y vertebrados, desde estad¨ªo embrionario 4 hasta estad¨ªo post-natal 10. Los ARNm  analizados fueron: a) Factores de transcripci¨®n Pax6, Brn3 y CRX, b) fotopigmentos cl¨¢sicos (rodopsina y opsina roja) y fotopigmentos no visuales (melanopsina similar a Xenopus, y variante similar a mam¨ªfero), c) las transducinas tipo prote¨ªna G participantes en ambas cascadas (¦Á-trans y Gq). Metodos: Se estudiaron dichos transcriptos en  cultivos de CGR inmunopurificados de 8 d¨ªas y en retina total a distintos estadios del desarrollo, por RT-PCR y RT-PCR en tiempo real. Resultados: Resultados preliminares indican una aparici¨®n temprana (d¨ªa embrionario 4-5) de los transcriptos involucrados en el desarrollo, especificaci¨®n y  funci¨®n de las CGRs (Pax 6, Brn3, Transducina tipo Gq, melanopsina M.). Aquellos transcriptos relacionados al desarrollo de fotorreceptores cl¨¢sicos o a la visi¨®n (Crx, transducina tipo ¦Á, opsina roja, rodopsina) aparecen m¨¢s tarde en el desarrollo (E8 en adelante). Los cultivos de CGR al estad¨ªo E8 muestran un patr¨®n diferencial en los transcriptos respecto a retina total de pollo adulto. Conclusiones: Los resultados sugieren la idea de que en estad¨ªos embrionarios tempranos de la retina de pollo, osciladores, fotopigmentos y elementos de la cascada de fototransducci¨®n de invertebrados podr¨ªan converger en la misma poblaci¨®n de CGR. Esta evidencia indica un interesante paradigma evolutivo, ya que estas c¨¦lulas conservan caracteres de c¨¦lulas ancestrales de invertebrados, siendo fotosensibles y funcionales desde estad¨ªos tan tempranos, antes de que ocurra la visi¨®n normal.