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Regulación fótica del sistema circadiano: mecanismo de fototransducción de CGR. Contín, M A1, Salvador G2, Ilincheta M2, Giusto NM2 and Guido, ME1. 1CIQUIBIC (CONICET) ? Dpto. Qca Biol., Fac. Cs. Químicas, NC-Córdoba; 2INIBIBB-UNS, Bahia Blanca. mcontin@mail.fcq.unc.edu.ar Introduccion: El sistema circadiano de los vertebrados está compuesto por osciladores (relojes) que regulan la fisiología y el comportamiento de los organismos. El núcleo supraquiasmático hipotalámico (NSQ) es el reloj central que regula las funciones fisiológicas de los osciladores periféricos presentes en diversos tejidos y además los sincroniza con las condiciones ambientales externas. La retina es un componente clave en el sistema circadiano ya que es el órgano encargado de receptar las condiciones ambientales de iluminación y transmitirlas al NSQ a través del tracto retino-hipotalámico. En los últimos años se ha demostrado que no solo conos y bastones tienen la capacidad de ser fotosensibles, sino que un pequeño número de células ganglionares retinales (CGR) que proyectan al NSQ pueden percibir luz generando así respuestas en el sistema circadiano. El objetivo de nuestro trabajo es estudiar en detalle el mecanismo molecular de fototransducción de las CGR. Nuestros y otros estudios demuestran que la naturaleza bioquímica de la fototransducción de las CGR involucra una cascada de fosfoinositidos similar a la conocida para los fotorreceptores de invertebrados (células rhabdomericas). Actualmente se conoce que la luz activa proteínas G de la familia Gq/11, las cuales activan la enzima fosfolipasa C (PLC) incrementando luego los niveles de Ca+2 intracelulares con la consecuente depolarización de la célula. Sin embargo aun no se conocen en detalles todos los eventos moleculares del mecanismo de fototranduccion de las CGR. Objetivos específicos: verificar la actividad de las enzimas involucradas en la síntesis de fosfoinositidos activados por PLC. Métodos: Se midió la formación de Inositol 3,4,5 trifosfato (IP3) y otros inositoles por columnas de cromatografia Dowex en cultivos primarios de CGR de pollo expuestos a luz blanca fría por diferentes tiempos. Este ensayo permitió evaluar la actividad de la fosfolipasa C específica para PIP2. Luego se midieron las actividades de enzimas involucradas en la fosforilación de fosfatidilinositolfosfato (PIP), fosfatidilinositol bifosfato (PIP2) y diacilglicerol (DAG), denominadas PI quinasa (PIK), PI fosfato quinasa (PIPK) y DAG quinasa (DAGK). Resultados: Los resultados muestran un incremento de IP3 de 1.3 veces en función del estimulo lumínico y una estimulación de entre dos y tres veces en las actividades de las PIK, PIPK y de la DAGK a partir de los cinco segundos de estimulación luminica. Conclusiones: Nuestros resultados indican que en la fototranducción de las CGR de pollo esta involucrada una cascada de fosfoinositidos con una regulación de activación de las enzimas de la síntesis de los mismos durante los primeros segundos de estimulación.

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