Regeneracion de plantas de Lotus glaber por cultivo in vitro de lamina foliar.

F. ESPASANDIN, P. SANSBERRO, C. LUNA, L. MROGINSKI.

Corrientes

Jornada; 16ma Reunion de Comunicaciones Cientificas y Tecnicas. Fac. de Cs. Agrarias. UNNE; 2005

Fac. de Cs. Agrarias. UNNE

Con el objeto de desarrollar un sistema que posibilite la clonaci¨®n de Lotus glaber Mill. se cultivaron trozos de l¨¢mina foliar (4 a 5 mm de longitud) extra¨ªdos de brotes j¨®venes provenientes de pl¨¢ntulas obtenidas por germinaci¨®n in vitro de sus semillas. Las semillas fueron previamente desinfectadas y cultivadas en un medio qu¨ªmicamente definido, compuesto por las sales y vitaminas de Murashige y Skoog (1962), semis¨®lido (agar 0.65 %) y adicionado con 30 gr¡¤L-1 de sacarosa. Al cabo de 15 d¨ªas de cultivo, se extrajeron porciones de hojas que fueron subcultivadas en un medio basal de igual composici¨®n, adicionado con diferentes concentraciones y combinaciones de ¨¢cido indolac¨¦tico (AIA), ¨¢cido naftalenac¨¦tico, (ANA), benciladenina (BA), cinetina (CIN) y thidiazuron (TDZ). Los cultivos fueron incubados a 27 ¡À 2 ¡ãC y 14 h de fotoper¨ªodo (116 ¦Ìmol¡¤m-2¡¤seg-1). Transcurridos 45 d¨ªas del subcultivo, pr¨¢cticamente en todos los medios ensayados se formaron v¨¢stagos, logr¨¢ndose los mejores resultados cuando se cultivaron trozos de l¨¢mina foliar en medios de cultivo suplementados con ANA y BAP, en donde (40.1¡À18.3%) de los explantes cultivados brindaron 19.7¡À3.3 brotes adventicios. Posteriormente ¨¦stos fueron subcultivados en un medio sin reguladores del crecimiento vegetal, regener¨¢ndose plantas completas al cabo de 75 d¨ªas desde la inducci¨®n. M¨¢s del 70% de las plantas obtenidas superaron la etapa de rustificaci¨®n manifestando un fenotipo normal.