Presencia de MDR (multidroga resistencia) y del regulador de la conductancia de la fibrosis quistica (CFTR) en celulas K562.

ASSEF Y., KUSNIER C., DAMIANO A., IBARRA C. Y KOTSIAS BA.

Mar del Plata, Argentina

Congreso; LXV Congreso Anual de la Sociedad Argentina de Investigaciones Clinicas; 2000

Sociedad Argentina de Investigaciones Clinicas (SAIC)

La distribución de la proteína MDR (multidroga resistencia) es complementaria a la del regulador de la conductancia en la fibrosis quística (CFTR). Nuestros objetivos fueron identificar estas proteínas en la línea celular K562 proveniente de una leucemia mieloide crónica humana y luego correlacionar su presencia con los canales iònicos presentes en las mismas. Para ello, se realizó una extracción de ARN total y por  RT-PCR, utilizando sondas que flanquean secuencias de nucleótidos altamente conservadas para cada uno de los genes, se amplificaron dichas secuencias. Se observó la presencia de bandas correspondientes a las secuencias amplificadas de CFTR y MDR1. Con patch clamp (en la configuración cell attached, n=5) con soluciones simétricas en la pipeta y en la solución extracelular (140 NaCl), se identificó un canal que fue activado por el agregado de forskolina (40 uM). Luego de la excisión de los parches activados, las transiciones de corriente indicaron un canal con una conductancia de 38 pS no altamente rectificante (n=6). El potencial de reversión (Er) mostró un corrimiento hacia potenciales más negativos luego del reemplazo de cloruro por gluconato, con una permselectividad del gluconato/Cl- de  0.32 +/- 0.06. El reemplazo de Na+ por NMDG no modificó el Er (n=5). Nuestros resultados sugieren que las características de los canales iónicos observados podrían ser atribuidos a un comportamiento no descripto de CFTR y/o MDR en células K562. Sin embargo, los experimentos realizados no permiten descartar si se trata de un canal anionico aún no identificado.