INTERACCION IN VITRO E IN VIVO DE BIFIDOBACTERIUM Y CLOSTRIDIUM DIFFICILE.

TREJO F. M., PÉREZ P. F. Y DE ANTONI G. L

Buenos Aires – Argentina

Congreso; Tercer Congreso Argentino de Microbiología de Alimentos; 2006

Clostridium difficile es el principal agente etiológico responsable de la mayoría de los casos de diarrea asociada a antibióticos (DAA) en pacientes hospitalizados. Alojado en el intestino produce dos toxinas (Tox A y Tox B) que desencadenan una reacción inflamatoria a nivel del epitelio intestinal produciéndose  cuadros que van desde diarrea hasta casos fatales de colitis pseudo membranosa. Estas infecciones son tratadas con vancomicina y metronidazol entre otros antibióticos. Algunos estudios han demostrado la eficiencia de  Saccharomyces boulardii y Lactobacillus bulgaricus, en el tratamiento de las DAA, sin embargo los mecanismos involucrados en esta protección no han sido esclarecidos aún. Ensayos in vitro las bifidobacterias (cepas CIDCA 532, 538, 5310, 5325 y 5331) se co-cultivaron con dos cepas de Clostridium difficile, ATCC 9689 y 117 de origen hospitalario). La actividad toxigénica fue evaluada mediante ensayos de desprendimiento de células Vero. Las células que permanecieron adheridas a la placa fueron teñidas y la absorbancia leída a 590nm. Ensayos in vivo (hámster). Lotes de 5 animales se trataron  con 3 mg de clindamicina por animal, posteriormente cada lote recibió diariamente una cepa de bifidobacteria (531, 5310, 5316, 5320, 5323 y 5325) en el agua de bebida (1012 CFU/ml). Al día 4 se administró i.g. la cepa 117 de clostridio (109UFC) y al día 8 se procedió al sacrificio y análisis del contenido del ciego. En los ensayos in vitro, las cepas 532, 538, 5310 y 5325 fueron capaces de disminuir la actividad citotóxica de Clostridium difficile. No hubo inhibición del crecimiento de clostridio en presencia de las bifidocaterias. Bifidobacterium no mostró capacidad para secuestrar toxina. Respecto de los ensayos in vivo, los animales tratados con la cepa 5310 sobrevivieron a la infección, no presentaron colitis y el contenido del ciego fue similar al del lote control sin infectar en el cual solo tres animales sobrevivieron presentando evidencias de colitis pseudomembranosa. Ciertas cepas de bifidobacterias inhibieron la acción toxigénica de Clostridium difficile la cual pudo deberse a la inhibición en la producción de toxina o a la inactivación de la misma durante el co-crecimiento. El tratamiento con Bifidobacterium bifidum CIDCA 5310 permitió una protección contra la infección, evitando la diarrea y la colitis pseudomembranosa. La protección de los animales contra clostridio puede deberse a interferencia en la colonización o una inhibición sobre la acción de la toxina. Estos resultados nos permiten pensar en la utilización de ciertas cepas de Bifidobacterium como agentes probiótico para la protección contra la acción de Clostridium difficile.