La activación de SLAM durante la tuberculosis activa induce la fosforilación de ERK y de CREB conduciendo a la producción de IFN-.

VIRGINIA PASQUINELLI; ROMINA H ASPERA; I. BELÉN ALVAREZ; JAVIER O JURADO; DARIO FERNANDEZ DO PORTO; A LORENA CIALLELA,; EDUARDO ABBATE; JORGE CASTAGNINO,; ROSA M MUSELLA; VERÓNICA E GARCÍA

Mar del Plata

Congreso; LVII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2009

Sociedad Argentina de Inmunología

El IFN-γ es crucial en la protección contra M. tuberculosis (Mtb). Previamente demostramos que SLAM induce  respuestas Th1 en tuberculosis (TB). Asimismo, la señalización vía SLAM en células estimuladas con Mtb induce la activación de CREB, un regulador positivo de la transcripción del IFN-γ. Aquí, investigamos la potencial relación entre SLAM-CREB e IFN-γ. Mediante citometría de flujo observamos que luego de estimulación con Mtb, la mayoría de las células IFN-γ+ coexpresan SLAM y pCREB (48,68 ±11,18), mientras que un menor porcentaje de células expresan una de las dos moléculas (%SLAM+pCREB-: 15,8±7,4; %SLAM-pCREB+: 6,8±4,3). Estos resultados demuestran que la inducción de IFN-γ mediada por SLAM en TB depende, al menos en parte, de la activación de CREB. Se conoce muy poco sobre las vías de señalización río abajo de SLAM. Se reportó que la señalización a través SLAM induciría la activación de la proteína kinasa Erk. A fin de analizar las vías de señalización inducidas por SLAM que contribuyen a activación de CREB y secreción de IFN-γ en TB, estudiamos la fosforilación de Erk luego de coestimulación a través de SLAM por western blot. La estimulación con Mtb ± anticuerpo agonista α-SLAM indujo la activación de Erk en células de pacientes con TB. Más aún, PD98059 (inhibidor de Erk) disminuyó significativamente la producción de IFN-γ determinada por ELISA (% inhibición (media ± SEM): 71,6 ± 7,4)  y por citometría de flujo intracelular (p<0,05) en células estimuladas con Mtb±α-SLAM. Efectos similares fueron observados con el inhibidor de la vía de p38MAPK.  Estos resultados demuestran que casi el 50% de las células secretoras de IFN-γ inducidas por Mtb coexpresan SLAM y pCREB. Asimismo, la producción de IFN-γ inducida por el antígeno y la activación de SLAM es, al menos en parte, mediada por la kinasa Erk.  Así, estos datos aportan información sobre las bases moleculares que funcionan durante la activación de SLAM conduciendo a la producción de IFN-γ en la TB activa.