Regulación y función de 4-1BB en linfocitos T de pacientes con tuberculosis pulmonar activa.

JAVIER O. JURADO; DARÍO A. FERNÁNDEZ DO PORTO; VIRGINIA PASQUINELLI; IVANA B. ÁLVAREZ; M. FLORENCIA QUIROGA; SANTIAGO ABAD; GASTÓN P. DE STÉFANO; ROSA M. MUSELLA; EDUARDO ABBATE; VERÓNICA E. GARCÍA

CORDOBA-ARGENTINA

Congreso; LVI Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2008

La protección contra Mycobacterium tuberculosis (Mtb) depende de la inmunidad mediada por células. La completa activación de linfocitos T (LT) requiere de dos señales. La primera dada por la interacción del TCR del LT y las moléculas del CMH de las células presentadoras de antígeno, y una segunda señal a través de las moléculas coestimulatorias. La molécula coestimulatoria 4-1BB pertenece a la familia de receptores del TNF y se ha observado que aumenta su expresión en LT luego de la activación. Por otra parte se ha demostrado que promueve la proliferación celular, la supervivencia in vitro, la producción de citoquinas en LT, y las respuestas citotóxicas de LT CD8. En este trabajo estudiamos el efecto de la estimulación con Mtb sobre la expresión de 4-1BB  en LT y el rol de 4-1BB sobre las funciones efectoras de los LT durante la infección por Mtb. Inicialmente analizamos la expresión de 4-1BB en células mononucleares de sangre periférica (CMSP) de pacientes con tuberculosis por citometría de flujo. Niveles mínimos de expresión basal de 4-1BB fueron detectados. Sin embargo, la estimulación antigénica con Mtb produjo un aumento significativo de la expresión de 4-1BB en LT de pacientes con tuberculosis (control: 9.5+/-3.4, Mtb: 35.2+/-8.1, p<0.05). Finalmente analizamos la capacidad citotóxica de los LT CD8+ (expresión de CD107a/b por citometría de flujo) y la producción de IFN-g a nivel de célula individual (expresión intracitoplasmática por citometría de flujo). Así, CMSP de pacientes con tuberculosis fueron estimuladas con Mtb en presencia/ausencia de a-4-1BB. Nuestros resultados mostraron que el bloqueo de 4-1BB en células estimuladas con Mtb disminuye significativamente la degranulación de los LT CD3+CD8+ (Mtb: 22.5+/-4.1, Mtb + a-4-1BB: 10.8+/-3.8, p<0.05) así como el porcentaje de LT CD3+CD4+FN-g+, (Mtb: 9.2+/-1.6, Mtb + a-4-1BB: 4.1+/-1.2, p<0.05) y de LT CD3+CD8+FN-g+, (Mtb: 15.3+/-3.7, Mtb + a-4-1BB: 8.5+/-3.8, p<0.05) respecto a LT cultivados sólo con antígeno. En conjunto, nuestros resultados demuestran que 4-1BB es regulado por Mtb y que la vía de 4-1BB aumenta la actividad citotóxica de los LT CD3+CD8+ y la producción de IFN-g por LT CD3+CD4+ y LT CD3+CD8+ de pacientes con tuberculosis activa, denotando un rol activador  de dicha vía de señalización sobre las respuestas efectoras de los LT durante la infección por M. tuberculosis.