Characterization of PhoQ, the magnesium sensor in Salmonella typhimurium”

MARÍA E. CASTELLI, CESAR R. OLSINA, FERNANDO C. SONCINI AND ELEONORA GARCÍA VÉSCOVI

Buenos Aires, Argentina

Congreso; IX Meeting of the Argentine Society of Microbiology; 2001

Sociedad Argentina de Microbiología

En Salmonella typhimurium, el sistema de dos componentes PhoP/PhoQ controla propiedades patogénicas esenciales. El dominio periplásmico del sensor PhoQ interactúa con la señal, el catión Mg2+, y promueve un cambio conformacional que resulta en la represión de los genes activados por PhoP. Postulamos un modelo en el cual la actividad autoquinasa de PhoQ permanece constante, mientras que la interacción del ligando señal con el sensor, promueve en este la activación de la fosfatasa específica para PhoP. Se analizó el rol del residuo H277 en la actividad fosfatasa de PhoQ, y las bases de la relación estructura-función para dicha proteína. La H277 fue reemplazada por otros aminoácidos y utilizando un sistema que permite determinar la actividad fosfatasa in vivo de PhoQ, se determinó que las sustituciones por arginina, glutamina, tirosina y serina, conservaron la actividad fosfatasa; mientras que cuando dicho residuo se sustituyó por arginina o lisina, esta actividad fue completamente anulada. Concluimos que el residuo H277 es estructuralmente importante pero no funcionalmente esencial para dicha actividad. El análisis de las actividades de diferentes subdominios del sensor, en los que se delecionó secuencialmente la región sensora o el H box, manteniendo los motivos conservadas G, N y F, permite concluir que la actividad fosfatasa depende del subdominio DHp.