Desarrollo de una columna de inmunoafinidad acoplada a un sistema de flujo continuo, para la cuantificación de anticuerpos IGG específicos para Helicobacter Pylori en suero humano

MESSINA, GERMÁN A.; STEGE, PATRICIA W.; DE VITO, IRMA; SILVA, MARÍA FERNANDA; MARTÍNEZ, LUIS DANTE

Buenos Aires, Argentina

Congreso; II Congreso Iberoamericano y IV Congreso Argentino de Química Analítica; 2007

Universidad de Buenos Aires

Helicobacter Pylori esun bacilo Gram negativo que coloniza la mucosa gástrica humana y es el agente causal de gastritis crónica, úlcera péptica y cáncer gástrico [1,2]. Los anticuerpos circulantes contra H. pylori son importantes párale diagnóstico y el seguimiento antimicrobiano [3]. Los anticuerpos presentes en el suero reaccionan con antígenis purificados de H. pylori inmovilizados en una columna de teflón de 3 cm de longitud con un id de 0,8 cm, rellena convidrio de porosidad controlada modificado con grupos aminopropil. Los anticuerpos unidos son cuantificados por un segundo anticuerpo anti cadena y conjugado con la enzima fosfatasa alcalina (AP). Esta enzima hidroliza la unión fosfato monoéster de p-nitrofenil fosfato, liberando p-nitrofenol (pNP) [4], el cual fue cuantificado espectrofotométricamente a 410 nm utilizando una celda de flujo de 100 ml. La absorbancia de pNP es proporcional a la actividad de AP y consecuentemente a la cantidad de anticuerpos específicos para H. pylori presentes en cada muestras. El tiempo total reanálisis no exedó los 30 min. En la práctica, la columna desarrollada permitió la determinación rápida, sensible y selectiva de anticuerpos para H. pylori cuando fue incorporada en un sistema FIA.