Producción de celulasa de Aspergillus niger en medios de cultivo sólido de papel blanco

BISCARI LUCÍA; BASSANI, GEORGINA; BOGGIONE MARÍA JULIA; FARRUGGIA BEATRIZ

Rosario

Congreso; XVI Congreso y la XXXIV Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 2014

Sociedad de Biología de Rosario

PRODUCCIÓN DE CELULASA DE Aspergillus niger EN MEDIOS DE CULTIVO SÓLIDO DE PAPEL BLANCO.Biscari, Lucía; Bassani, Georgina; Boggione María Julia yFarruggia, BeatrizIPROByQ. ?Laboratorio de Fisicoquímica aplicada a la bioseparación? Área Fisicoquímica. Departamento de Química Física de la Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. UNR.gbassani@fbioyf.unr.edu.arLa acción de un sistema complejo de enzimas fúngicas extracelulares compuesto principalmente por tres tipos de enzimasque actúan en forma sinérgica: endoglucanasa,exoglucanasa y-glucosidasa es el responsable de la degradación del polímero de celulosa. El proceso de degradaciónrepresenta un paso clave para la generación eficiente de biocombustibles como etanol o butanol a partir de desechos industriales. Un microorganismo celulolíticocapaz de reciclar este polímero es el hongo aerobio Aspergillusniger, el cualpuede ser empleado en fermentación en estado sólido (FES). El bajo contenido de agua y la sencillez de su infraestructura hace a este tipo de producción ventajosa respecto al cultivo en medio líquido tradicional. El objetivo del trabajo fue obtener y caracterizar la producción de celulasas a partir de la cepa NRRL3 de A. niger empleando como medio sólido papel,como fuente de carbono y soporte de crecimiento para el microorganismo. Como primer modelo experimental se utiliza en este trabajo papel blanco para luego extenderlo a la utilización de papeles de deshecho. Se propagó al microorganismo en recipientes con agar papa glucosado incubándolo a 30°C durante 5 días. Se utilizó papel blanco como fuente de carbono y soporte de crecimiento al cual se le incorporóel inoculo fúngico, se homogeneizóe incubó a 30°C durante 16 días.El extracto enzimático se obtuvo por extrusión del medio de cultivo adicionándole una solución tamponadade acetato,se homogeneizó y filtró sobre un colador metálico de poro fino y finalmente se centrifugó a 10000rpm por 10 minutos. En el sobrenadante se midió el pH en función del tiempo, proteínas totales mediante el método de Warburgy actividad enzimática de endoglucanasa,exoglucanasa y -glucosidasa empleando como sustrato carboximetil celulosa, papel Whatman N°1 y p-nitrofenil-glucopiranósidorespectivamente. La caracterización del soportey el cultivo se llevó a cabo a través de las determinaciones de: índice de absorción de agua(IAA), punto de humedad crítica(PHC), densidad de empaquetamiento(DE) y biomasa (B).Los resultadosindicaron que no hubo cambios de pHen función del tiempo de incubación y respecto a las actividadesespecíficas enzimáticas ensayadas, los máximos valores de producción se presentaron para endoglucanasa y exoglucanasa a los 3 días, y para -glucosidasa a los 8 días,siendo los máximos de producción de proteínas a los 14 días yde biomasa a los 16 días. IAA de 3,41 g/g peso seco, PHC de 9,17 % y DE 20,50 10-2g/cm3.El papel blanco puede emplearse como una fuente económica de reciclaje en los procesos de FES para la producción de celulasas, la selección de los extractos según los días del cultivo permitirá mejorar las condiciones de futuras purificaciones. Se proyecta para próximos trabajos el empleo de papel de reciclado con iguales objetivos.