La horquilla beta de microcina J25, importante para el transporte del antibiótico, no estaría involucrada en la inhibición de la RNA-polimerasa y del consumo de oxígeno

BELLOMIO, AUGUSTO; VINCENT, PAULA A.; ARCURI, BEATRIZ FERNANDEZ DE; SALOMÓN, RAUL A.; FARÍAS, RICARDO N.; MORERO, ROBERTO D.

Mar del Plata, Argentina

Congreso; Sociedad Argentina de Biofísica, XXXIII Reunión Anual, Congreso Conjunto de Sociedades Biomédicas de la Argentina; 2004

Sociedades Biomédicas de la Argentina, Sociedad Argentina de Biofísica

La estructura de microcina J25 (MccJ25) [G1-G-A-G-H5-V-P-E-Y-F10-V-G-I-G-T15-P-I-S-F-Y20-G], presenta una unión lactámica entre el grupo a-amino de Gly1 y el carboxilo-g de Glu8, formando un anillo de 8 residuos (Gly1-Glu8). El resto de la cadena (Tyr9-Gly21) atraviesa el anillo quedando atrapado estéricamente por los residuos aromáticos Phe19 y Tyr20. Mediante tratamiento con termolisina se obtuvo un derivado (MccJ25-Th19) de dos cadenas: la A (Gly1-Phe10) y la B (Ile13- Gly21) que aún permanece atrapada dentro del anillo. MccJ25 ingresa al citoplasma de Escherichia coli luego de atravesar las membranas externa e interna a través de los receptores específicos FhuA y SbmA respectivamente. Su blanco de acción es la RNA polimerasa (RNAP) en E. coli y en Salmonella newport actúa además sobre la membrana celular inhibiendo el consumo de oxígeno.     MccJ25-Th19 fue capaz de inhibir “in vitro” a la RNAP, pero no afectó el crecimiento de varias cepas de E. coli. Sin embargo, MccJ25-Th19 inhibió el crecimiento y la síntesis de RNA “in vivo” de las cepas de E. coli MC4100 y AB259 transformadas con plásmidos con fhuA o sbmA clonados. MccJ25-Th19 conserva actividad antimicrobiana disminuida y la capacidad de inhibir la respiración “in vivo” en cepas de salmonella.     Estos resultados indican que la estructura de la orquilla beta afectada por el tratamiento con termolisina: a) es muy importante para el transporte del péptido al interior de la célula y b) no influye en la inhibición de la RNAP ni en la inhibición del consumo de oxígeno. Por lo tanto la región del anillo con el extremo C-terminal enhebrado, cuya estructura se conserva intacta en MccJ25-Th19, tendría un rol importante en los efectos inhibitorios inherentes a la actividad antimicrobiana de MccJ25.