Selectividad en ensayos de reconocimiento sobre superficies de oro modificadas

D. PALLAROLA; L. DOMENIANNI; G. PRIANO; F. BATTAGLINI

La Plata, Pcia. de Buenos Aires

Congreso; XVII Congreso de la Sociedad Iberoamericana de Electroquímica; 2006

Sociedad Iberoamericana de Electroquímica

La detección de interacciones específicas entre moléculas de origen biológico como antígeno/anticuerpo o la hibridación de ADN juega un importante rol como herramienta de diagnóstico en áreas como la medicina o la biología molecular.             El proceso de detección se realiza utilizando distintas técnicas de transducción, ya sea en forma directa como: espectroscopía de resonancia del plasmón superficial (SPR) o microbalanza de cuarzo (QCM); o en forma indirecta a través de la marcación con moléculas fluorescentes o enzimas (con posterior detección electroquímica, colorimétrica o luminiscente).             En muchos de los casos anteriormente citados, oro resulta una superficie ideal para ser utilizado como plataforma para estos ensayos, pero un tema a tener en cuenta son las interacciones que existen entre esta superficie, sus derivados y el analito a determinar, denominadas comúnmente como procesos de adsorción no específica.             En este trabajo se estudia la adsorción no específica de avidina marcada con peroxidasa sobre superficies de oro modificadas con cistamina (Au/Cys) y cistamina y CM-Dextran (Au/Cys/CMDex) introduciendo grupos carboxilatos para su posterior modificación. Posteriormente, esta última plataforma se modificada con biotinhidracina (Au/Cys/CMDex/biot). Las superficies mencionadas anteriormente son tratadas con derivados de polietilenglicol (PEG) de distinto peso molecular (174, 400, 5000 Daltons).             El monitoreo de estas interacciones se realizan por amperometría, utilizando el ciclo catalítico entre la peroxidasa, un complejo de osmio y peróxido de hidrógeno.       De nuestros estudios se observa que Au y Au/Cys son superficies que presentan una importante adsorción no específica para proteínas; Para Au/Cys/CMDex, la adsorción no específica disminuye, pero aun es importante si se compara con los resultados obtenidos para Au/Cys/CMDex/biot. La introducción de derivados de PEG produce importantes mejoras, reduciendo la adsorción no específica en un 50%. Se presentan resultados sobre el tratamiento hecho a la superficie con CMDex/PEG observándose que los mejores resultados se obtienen con el PEG de mayor peso molecular.