Técnica de microesferas recubiertas en plataforma múltiple Luminex para evaluación de anticuerpos anti-HLA

PICHON-RIVIERE A,; AUGUSTOVSKI, F; GARCIA MARTÍ, SEBASTIAN; BARDACH, ARIEL; GALANTE, J; LOPEZ, A; REGUEIRO, A; GLUJOVSKY, D; ARUJ, PATRICIA; CALCAGNO, JI

Documento de Evaluacion de Tecnologias Sanitarias - IECS

IECS

Año: 2009 p. 1 - 30

1668-2793

Los antígenos leucocitarios humanos (HLA, del término en inglés ?Human Leukocyte Antigens?) son moléculas presentes en la superficie de casi todas las células de un individuo y cumplen un rol fundamental en el reconocimiento inmunitario de lo propio con respecto a lo ajeno. Para que donante y receptor de un transplante sean compatibles, estos antígenos deben ser similares y el receptor no debe poseer anticuerpos preformados hacia aquellas moléculas del donante. Para determinar la presencia de estos anticuerpos (DSA, anticuerpos específicos contra el donante, del término en inglés ?Donor specific antibodies?) se utiliza la prueba cruzada (crossmatch) en la que se ponen en contacto el suero del donante con el del receptor y se evalúa el porcentaje de antígenos del donante para los cuales el receptor posee anticuerpos. La técnica más utilizada tradicionalmente es el test serológico basado en la citotoxicidad dependiente del complemento (CDC, del término en inglés ?Complement Dependent Cytotoxicity?), aunque recientemente fueron desarrolladas otras tecnologías como citometría de flujo, ELISA, y la técnica de microesferas recubiertas en plataforma múltiple Luminex. Las mismas permiten analizar contra qué antígenos en particular están dirigidos los anticuerpos encontrados. Esto permitiría identificar qué anticuerpos son clínicamente relevantes para predecir un rechazo de transplante. En este documento nos enfocaremos en la técnica de Luminex. Se postulan como ventajas principales, con respecto al resto de las técnicas, una mayor precisión y eficiencia. La tecnología Se basa en la utilización de una fase líquida con microesferas recubiertas con múltiples antígenos, a la cual se agrega el suero a evaluar. Posteriormente mediante técnicas colorimétricas se identifican las uniones específicas a cada una de las microesferas. Objetivo El objetivo del presente informe es evaluar la utilidad de la técnica de microesferas recubiertas en plataforma múltiple Luminex para la detección de anticuerpos anti-HLA. Métodos Se realizó una búsqueda en las principales bases de datos bibliográficas (MEDLINE, EMBASE, Cochrane, DARE, NHS EED), en buscadores genéricos de Internet, agencias de evaluación de tecnologías sanitarias y financiadores de salud. Se priorizó la inclusión de revisiones sistemáticas, ensayos clínicos controlados aleatorizados, evaluaciones de tecnologías sanitarias y económicas, guías de práctica clínica y políticas de cobertura de otros sistemas de salud. Resultados No se encontraron revisiones sistemáticas ni ensayos clínicos aleatorizados. Se incluyeron 10 estudios observacionales (algunos de cohorte y otros transversales) cuyo diseño se basa en la comparación de diferentes técnicas de medición de anticuerpos anti-HLA tomando sueros pretransplante, tanto almacenados de pacientes ya transplantados como de pacientes en listas de espera. Se describen a continuación aquellos estudios en los que se correlacionaron los hallazgos con el desenlace clínico posterior. Gibney y col. (2006) evaluaron con la técnica Luminex los sueros conservados de 136 pacientes sometidos a transplante renal. De los pacientes a los que les fueron detectados anticuerpos sólo mediante Luminex y no mediante CDC, se les efectuó una prueba cruzada mediante Luminex a fin de detectar cuántos de estos anticuerpos eran DSA. Entre estos pacientes, aquellos con DSA+ tuvieron tasas más altas de funcionamiento retardado del injerto (30% versus 9%, p=0,04) y rechazo agudo demostrado por biopsia (25% versus 3% p=0,01), y tasas más bajas de sobrevida del injerto a los 6 meses (75% versus 94%, P=0,04), que aquellos con DSA-. En el estudio de Smith y col. (2007) el suero pretransplante de 565 pacientes sometidos a transplante cardíaco fue evaluado retrospectivamente para detectar la presencia de anticuerpos anti-HLA y de DSA utilizando las técnicas CDC, Luminex convencional, y unión de complemento mediante Luminex. Mientras que 0,8% de los pacientes tuvieron DSA detectados mediante CDC, el número ascendió al 3% al ser evaluados con Luminex. La sobrevida del injerto al año fue de un 42% en los pacientes con anticuerpos anti-HLA CDC?/Luminex+ con DSA+ (n=19) y de un 77% en el grupo DSA- (n=39, p=0,0039). Por otro lado Berg-Loonen y col. (2008) publicaron un estudio en el que fue evaluado retrospectivamente mediante Luminex el suero de 27 pacientes sometidos a transplante renal con antígenos HLA no idénticos al del donante. De los 27 pacientes, 13 resultaron ser DSA+ por Luminex pretransplante y 14 DSA-. Los episodios de rechazo agudo resultaron ser más frecuentes y precoces en el grupo DSA+ (46%) que en el grupo DSA- (14%), sin embargo a los 8 años no hubo diferencias en la sobrevida del injerto. Otros estudios evaluaron la sensibilidad de la técnica Luminex para detectar anticuerpos anti-HLA y coincidieron en demostrar que la misma es mayor a CDC y ELISA. Algunos trabajos encontraron que la sensibilidad de Luminex podría ser menor a la de la citometría. Algunas publicaciones demostraron la presencia de anticuerpos no fijadores de complemento en los sueros pretransplante que no habían podido ser detectados mediante CDC. Ninguno de estos estudios analizó las implicancias clínicas de las diferencias encontradas. Políticas de cobertura No se han encontrado políticas de cobertura. Costo El costo en la Argentina por paciente es de aproximadamente 2000 pesos argentinos año 2009. Conclusiones La evidencia proviene de estudios observacionales. Las diversas mediciones efectuadas con Luminex coinciden en que su sensibilidad es mayor a la de las técnicas CDC y ELISA, aunque probablemente sea menor a la de la citometría de flujo. Los estudios que evalúan el impacto clínico de los anticuerpos anti-HLA encontrados con Luminex coinciden en que la presencia de aquellos anticuerpos que son DSA+ aumenta la probabilidad de episodios de rechazo agudo, aunque sus resultados difieren en cuanto al impacto que estos anticuerpos tienen en la sobrevida del injerto.