Desarrollo de una metodología simple y económica para cuantificar Diclazuril en tejido animal por HPLC-DAD

AZCARATE FEDERICO; BOSCHETTI CARLOS

Santa Fé

Congreso; VI Congreso Argentino de Química Analítica; 2011

AAQA

Introducción: Diclazuril (DZL) es un anticoccidiano que seadiciona en alimentos balanceados con el fin de prevenir y tratar lacoccidiosis, enfermedad amoébica que afecta a los animales de corral. Debido atal aplicación los organismos reguladores han establecido niveles de referenciapara DZL; en Argentina, SENASA indica un límite máximo permitido de residuo de3,0 y 0,5 mg/Kg para hígado y músculo respectivamente. Varios métodospublicados se aplican a la determinación de DZL en alimentos balanceados, en elrango de 0,1 a1,5 mg/Kg [1,2]. Unos pocos métodos describen la determinación de DZL en tejidoanimal, y requieren el uso de LC-MS/MS [3,4]. En este trabajo se presenta unmétodo simple para la determinación de DZL en tejido animal, capaz de llegar aun LOQ menor al requerido por SENASA como máximo permitido de residuo, y en elque se evita el empleo de LC-MS.Análisis de las muestras: Sobre el tejido previamente picado se realizó un pasode extracción, una etapa de limpieza de restos lipídicos, y la cuantificacióndel extracto en un cromatógrafo líquido de alta eficiencia Agilent 1100 condetección de arreglo de diodos a 276 nm. Para la separación se utilizó unacolumna Agilent C18 de 150 mmx 4.6 mmx 5 um y se empleó una fase móvil acetonitrilo-agua 1-1.Resultados: Se realizó un estudio de linealidad de patrones analizando cincodiluciones de DZL en el rango de 0,26 a 2,04 ug /mL por triplicado, obteniéndose un valor der2 mayor a 0,995. Para validar la técnica se trabajó con cinco muestrasfortificadas en el rango de 51 a 408 ug/Kg analizándose cada nivel por triplicado. Elexperimento se repitió a los quince días por otro técnico para evaluar lasvariables tiempo y analista. La recuperación promedio fue de 74,6 % con undesvío estándar de 5,9 y un coeficiente de variación porcentual de 7,9. Loslímites de cuantificación y de detección alcanzados fueron de 52,2 y de 17,4ug/Kg respectivamente. Se realizó un estudio de robustez siguiendo elprocedimiento de Yoden y Steiner para establecer los puntos determinantes del procedimiento.Conclusiones: Se desarrollo una metodología simple, económica y robusta paracuantificar DZL en tejido animal, que cumple con todas las especificacionesestablecidas por SENASA y permite cuantificar el compuesto en nivelesinferiores a los requeridos por las regulaciones.Bibliografía: [1] De Kock, J.; De Smet, M.; Sneyers, R.J. Chromatogr. 606 (1992) 141.[2] Blanchflower, W.J.; Hughes, P.J.; Cannavan, A.; Kennedy, D.G. J. AOAC Int.77 (1994) 1061.[3] Mortier L.; Daeseleire E.; Huyghebaert G.; Grijspeerdt K.; Van Peteghem C.J. Agric. Food Chem. 53 (2005) 905.[4] Mortier L.; Daeseleire E.; Van Peteghem C. Anal. Chim.Acta. 529 (2005) 229.