Determinación de antibióticos polipeptídicos en tejido animal por UHPLC-DAD

AZCARATE FEDERICO; BOSCHETTI CARLOS

Santa Fé

Congreso; VI Congreso Argentino de Química Analítica; 2011

AAQA

Introducción: En la fabricación de alimento balanceado paracría de animales se suelen agregar diferentes agentes como promotores decrecimiento, ejemplo de este tipo de compuestos son Bacitracina (BAC) yVirginiamicina (VIR), dos antibióticos polipeptídicos de origen microbiano. Lasentidades reguladoras establecen límites para residuos de estos antibióticos enel tejido de animales al momento de su faena; en Argentina SENASA indica unmáximo permitido de 500 ug/Kg para BAC y de 100 ug/Kg para VIR [1-3]. En estetrabajo se presentan los avances realizados en el desarrollo de un métodocromatográfico para confirmar y cuantificar presencia de estos residuos entejido animal.Extracción y preconcentración de las muestras: Para estudiar el solvente deextracción se trabajó con muestras de tejido fortificadas con ambos analitos,los solventes evaluados fueron metanol, acetonitrilo, acetato de etilo, ácidoclorhídrico 0,1 My mezclas de metanol- agua y metanol-ácido clorhídrico 0,1 M. Una vez seleccionadoel solvente de extracción se evaluó la forma de concentrar y limpiar dichoextracto mediante extracción en fase sólida (SPE), utilizando cartuchos OasisHLB y C18. Para esto, previo a la siembra se evaporó el solvente de extraccióny se retomó en buffer fosfato a pH 8. La elución se realizó con acetonitrilo.Análisis cromatográfico: La determinación se realizó con un cromatógrafolíquido de ultra alta eficiencia Waters Aquity con detector de arreglo dediodos a 254 nm. La separación se efectuó con una columna Thermo de 50 x 2,1 x1,9 usando como fase móvil un gradiente de buffer fosfato pH 3 y acetonitrilo.Discusión: El mejor resultado, en términos de % de recuperación, se logró conla mezcla metanol-ácido clorhídrico 0.1 M como solvente de extracción. Respecto alpaso de concentración por SPE los resultados fueron diferentes dependiendo delanalito; para BAC la mejor recuperación se alcanzó a pH 8 empleando columnasOasis HLB, mientras que para VIR se consiguieron buenas recuperaciones con amboscartuchos a los diferentes pH estudiados (3, 4,8 y 8). Las recuperacionesfinales alcanzadas fueron 40% para BAC y 60% para VIR. La metodología logradaes aplicable solamente para VIR, debido a que para BAC no se alcanza larecuperación indicada por SENASA, que establece un rango de 60-110% para estosmétodos. Se proponen alternativas en la preconcentración para mejorar estosresultados.Bibliografía: [1] Capitan-Vallvey L. E.; Navas N.; Titos A.; Checa R.Chromatographia. (2001), 54.[2] Van Poucke C.; De Keyser K.; Baltusnikiene A.; McEvoy J. D.G.; VanPeteghema C. Anal. Chim.Acta. 483 (2003) 99.[3] Chun-hong Wan E.; Ho C.; Wai-mei Sin D.; Wong Y. Anal. Bioanal. Chem. 385 (2006) 181.