La Ouabaina protege la viabilidad de células endoteliales glomerulares renales humanas del efecto de la toxina Shiga tipo 2 y SubAB.

GIRARD MAGALÍ CELESTE; IBARRA CRISTINA; AMARAL MARÍA M

Mar del Plata

Congreso; LVIII REUNIÓN CIENTÍFICA ANUAL Sociedad Argentina de Investigación Clínica REUNIÓN CIENTÍFICA ANUAL 2013 Sociedad Argentina de Fisiología XLV REUNIÓN CIENTÍFICA ANUAL Sociedad Argentina de Farmacología Experimental; 2013

SAIC. SAFIS. SAFE

La apoptosis de células endoteliales y epiteliales renales observada en biopsias de pacientes que desarrollan Síndrome Urémico Hemolítico (SUH) pone en evidencia la citoxicidad de la toxina Shiga tipo 2 (Stx2). Además, se postula que la citotoxina Subtilasa (SubAB) presente en cepas de Escherichia coli productor de Stx también contribuiría a esta enfermedad. Nosotros demostramos previamente que la Stx2 y la SubAB disminuyen la viabilidad celular e inducen apoptosis de cultivos primarios de células endoteliales glomerulares humanas (HGEC). Recientemente, se propuso que la Ouabaina (OUA) actúa como un agente protector de la apoptosis causada por la Stx2 en células epiteliales renales de rata. El objetivo de este trabajo fue estudiar si el pre-tratamiento con OUA disminuye la citotoxicidad de Stx2 y de SubAB en células endoteliales y epiteliales humanas. Para ello se utilizaron cultivos primarios de HGEC, la línea de modelo de epitelio proximal renal humano (HK-2) y células VERO. Las HGEC se aislaron de fragmentos de riñones pediátricos provenientes de nefrectomías realizadas en el Hospital Nacional Prof. Alejandro Posadas. La viabilidad se evaluó mediante la incorporación de rojo neutro. Las células VERO fueron incubadas con OUA (100 nM a 2,5 nM) por 72 hs y se determinaron las concentraciones que no fueran citotóxicas mediante ensayos viabilidad celular. Luego, las VERO, HGEC y HK-2 se pre-trataron con OUA (30 nM a 5 nM) por 24 hs y posteriormente se incubaron con OUA + Stx2 (10-20 ng/ml) durante 48 hs adicionales. La protección máxima en la viabilidad celular se obtuvo con OUA 10 nM para las VERO (86 %, n= 5, p