Evaluación de biomarcadores de genotoxicidad en Rhinella arenarum

VILLANOVA JORGELINA; GOMEZ DIEGO SEBASTIAN; FLAVIA BIECZYNSKI; JULIA OUSSET; MALENA MORELL; NATALE GUILLERMO SEBASTIAN; VENTURINO ANDRES

Jornada; XXXIX Jornadas Interdisciplinarias de Toxicología; 2022

En el Alto Valle de Neuquén y Río Negro, la fruticultura y la explotación de hidrocarburos como principales actividades económicas generan diferentes tipos de contaminantes ambientales. Entre los parámetros más utilizados para evaluar genotoxicidad en organismos acuáticos se encuentran las evaluaciones de micronúcleos (MNs) y el ensayo Cometa (EC). El objetivo del presente trabajo fue evaluar los efectos ejercidos por las diferentes actividades antrópicas en eritrocitos de Rhinella arenarum, utilizando MNs y EC como biomarcadores de genotoxicidad. Se compararon 7 sitios: 2 sitios de referencia con bajo impacto antrópico y 5 sitios con diferente tipo y magnitud de actividad desarrollada incluyendo producción fruti-hortícola, mixta-hidrocarburífera, y urbanización. En cada sitio se recolectaron hasta 15 individuos y se les extrajo sangre de la vena femoral. Para analizar MNs se realizaron dos extendidos por individuo para tinción por Giemsa, por microscopía óptica se contabilizó la frecuencia de MNs en 1000 eritrocitos. Para EC se realizó la tinción con Ioduro de propidio, se analizó por microscopio de fluorescencia y se calculó el porcentaje de células dañadas e índice de daño genético (IDG = [I (I) + 2 (II) + 3 (III) + 4 (IV) / N (0--IV)]). Los datos fueron analizados mediante test no paramétrico de Kruskal Wallis, prueba de Chi cuadrado para comparar frecuencias de individuos con daño en el ADN y análisis de componentes principales para estudiar la contribución en la variabilidad de la respuesta. Los resultados muestran que los sitios con mayor intensidad de actividades productivas presentan individuos con mayor índice y porcentaje de genotoxicidad (sitios de referencia IDG=1,5±0,5, % cel dañadas= 42,2±16,1, MN= 1,06±0,3 vs. sitioscon mayor impacto IDG= 2,8±0,1, % cel dañadas= 80,99±4,1, MN= 2,8±0,2), indicando que los adultos de R. arenarum se encontrarían expuestos a compuestos genotóxicos en dichos ambientes. El análisis de componentes principales demuestra la preponderancia casi absoluta de la primera componente (94,4% de la variabilidad) coincidiendo los biomarcadores en el mismo sentido de efecto. La proyección de los sitios en el plano muestra una separación neta de los sitios de referencia y uno urbano, con respecto a los otros que presentan una graduación de respuesta. Podemos concluir que los biomarcadores de MN y EC brindan información complementaria y útil para evaluar genotoxicidad en R. arenarum y que sus respuestas se relacionarían en forma relativamente proporcional al grado de impacto según las actividades antrópicas registradas.