DISEÑO Y PRODUCCION DE UN KIT DE DIAGNOSTICO SEROLOGICO DE HIDATIDOSIS EN HOSPEDEROS INTERMEDIARIOS

POGGIO, THELMA VERÓNICA; MARINA GALLO CALDERON; JUAN JAVIER SERAFINO; JENSEN OSCAR

Tandil

Congreso; XL Jornadas Internacionales de Hidatidosis-XXXII Jornadas Nacionales de Hidatidos; 2017

Asociación Internacional de Hidatidosis Asociación Argentina de Hidatidología

DISEÑO Y PRODUCCION DE UN KIT DE DIAGNOSTICO SEROLOGICO DE HIDATIDOSIS EN HOSPEDEROS INTERMEDIARIOSSerafino, Juan1; Gallo Calderón Marina B1; Jensen Oscar2; Larrieu Edmundo3; Poggio T Verónica11 Centro de Virología Animal ? CEVAN-Instituto de Ciencia y Tecnología ?Cesar Milstein-CONICET Saladillo 2468, C1440FFX. Bs As, Argentina.2 Centro de Investigación en Zoonosis. Provincia del Chubut, Argentina. 3 Univ.Nac.de Rio Negro, Sede Alto Valle. vpoggiocevan@centromilstein.org.ar Echinococcosis quística, E granulosus, inmunodiagnóstico, ovinos, antigeno 8-kDa recombinante IntroducciónNo existe en el mercado disponibilidad de equipos de diagnóstico serológico de Echinococcus granulosus para uso en ovinos y caprinos. El análisis del genoma de E granulosus muestra que la familia de proteínas de 8-kDa del Ag B está compuesta de un número de variantes ampliamente distribuidas y con reactividad cruzada entre las tenias. No obstante, algunas variantes de la proteína de 8-kDa pueden ser usadas para el diagnóstico específico de infecciones por metacestodos.ObjetivoDesarrollar y validar nueva tecnología diagnostica para detección de anticuerpos contra antígenos de E granulosus en ovinos y caprinos por inmunoinmunoanalisis.Materiales y MétodosLa proteína recombinante de 8-kDa fue expresada como cuerpos de inclusión, purificada y caracterizada inmunológicamente. Para estandarizar la técnica y verificar parámetros de validación de acuerdo con el Manual de la OIE se desarrolló un panel de sueros control a partir de muestreos de ovinos de zonas endémicas, libres de la enfermedad, y de animales involucrados en pruebas con descarga del parásito colectados durante los ensayos con la vacuna Providean Hidatil EG95®. Resultados Se concluyó la etapa de estandarización de la técnica para diferenciar animales infectados experimentalmente y naturalmente infectados, de animales no infectados. Se observo un minimo grado de reactividad cruzada con otros agentes relacionados y se eliminó la potencial interferencia con animales vacunados. Se verificó el desempeño analítico de la técnica con resultados q cumplen con los criterios de aprobación fijados.Conclusiones Se han completado las etapas de clonado, expresión y purificación del antígeno 8-kDa recombinante y, estandarización y validación. El método de detección serológica sensibilizando con un antígeno recombinante podría ser usado satisfactoriamente para reemplazar al líquido hidatídico eliminando el uso de material infectivo y la variabilidad de lotes.