Uso del CRX como marcador de linaje celular en la detección molecular de células de retinoblastoma en sitios metastáticos

TORBIDONI ANA VANESA; OTTAVIANI DANIELA; ALONSO CRISTINA; DE DÁVILA MARÍA TERESA; ALONSO DANIEL; CHANTADA GUILLERMO

Congreso; LVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2013

Introducción: La identificación de células del retinoblastoma en sitios extraoculares se basa en la expresión de moléculas relacionadas con la estirpe tumoral, comunes a otros tumores neuroectodérmicos. Siendo el origen de este tumor un precursor de los fotorreceptores del tipo conos, moléculas relacionadas con este linaje podrían ser de utilidad en la identificación de la diseminación extraocular. Entre estas proteínas el factor de transcripción de conos y bastones con caja homeo (CRX) ha sido detectado en retinoblastomas y para identificar células tumorales en casos aislados. Objetivos: Evaluar la detección de CRX por transcripción reversa seguida de PCR en tiempo real para evidenciar la presencia de células de retinoblastoma diseminadas en muestras de médula ósea (MO). Materiales y Métodos: Analizamos muestras almacenadas en el bando de tumores prospectivamente de todos los pacientes (n=6) con retinoblastoma metastático desde 2008 a 2012. Diseñamos cebadores específicos para el ARN de CRX y GAPDH. Aislamos el ARN de las MO y sintetizamos el cADN usando hexámeros al azar. La PCR en tiempo real la realizamos con los cebadores específicos. Resultados: Detectamos amplificación de CRX en los 6 pacientes con retinoblastoma metastásico en las muestras de MO al diagnóstico. En muestras analizadas al final de la inducción quimioterápica (n=4), no se evidenció expresión de CRX, coincidente con la evolución clínica ya que estos pacientes mantuvieron la remisión completa en MO (2 de ellos se mantienen en remisión luego de trasplante de MO). Descartamos la expresión de CRX en muestras de MO de 10 pacientes sin retinoblastoma. Conclusiones: Las células metastáticas del retinoblastoma en la MO expresan  CRX como marcador de linaje lo que, además de ser de utilidad con fines diagnósticos, puede ser un candidato para ser utilizado como marcador molecular de enfermedad mínimamente diseminada.