Estimación de la divergencia genética entre poblaciones de Calomys musculinus mediante la técnica de RAPDs-PCR

CHIAPPERO, M.B.; CALDERÓN, G.E.; GARDENAL, C.N.

Puerto Iguazú

Congreso; XIII Jornadas Argentinas de Mastozoología; 1998

Sociedad Argentina para el Estudio de los Mamíferos

Trabajos anteriores en nuestro laboratorio utilizando alozimas como "marcadores" genéticos, mostraron alta similitud entre poblaciones de Calomys musculinus de la Pampa Húmeda, lo cual no permite la caracterización de subpoblaciones geográficamente próximas. Las frecuencias de alozimas pueden estar influenciadas por factores selectivos, que al ser similares en la mayor parte del área estudiada, podrían determinar una sobre-estimación de los niveles de flujo génico. Entre los marcadores de ADN, los fragmentos amplificados por primers arbitrarios (RAPDs) son ampliamente utilizados para analizar la estructura genética de poblaciones ya que son altamente polimórficos y generalmente no están sujetos a selección natural. Como continuación de los estudios sobre estructura genética de poblaciones de Calomys musculinus, hemos iniciado el análisis del polimorfismo detectable mediante la técnica de RAPDs en muestras de la zona endémica de Fiebre Hemorrágica Argentina y de la zona marginal. El aislamiento de ADN se realizó a partir de miestras de hígado, mediante extracción fenólica según técnicas convencionales. Las primeras pruebas se realizaron en ejemplares de bioterio; de un total de 20 primers ensayados, se seleccionaron tres que producían patrones de bandas altamente reproducibles, adecuados para el análisis a nivel poblacional. Se efectuaron pruebas de cruzamientos dirigidos, que permitieron determinar que los fragmentos seleccionados son caracteres heredables. Las muestras de poblaciones naturales hasta ahora analizadas procedieron de Uranga (Santa Fe), San Pedro (Buenos Aires) y Laguna Larga (Córdoba). La variabilidad genética en loci de RAPDs se manifiesta generalmente como presencia/ausencia de bandas. Mediante el programa RAPDS (W.C. Black, 1996) estos datos se transformaron en frecuencias alélicas, lo cual permitió calcular la distancia genética según Nei y el índice FST, medida de la varianza estandarizada de las frecuencias génicas entre poblaciones. De un total de 46 loci, 41 fueron polimórficos en todas las poblaciones. De ellos, 18 mostraron variación significativa entre las muestras (FST entre 0,09 y 0,52). Las distancias de Nei oscilaron entre 0,059 y 0,10. Los  valores obtenidos con esta técnica, de alrededor de un orden de magnitud superiores a los mismos índices calculados con datos de alozimas, ponen de manifiesto niveles importantes de divergencia genética entre poblaciones de C. musculinus. La ampliación de estos estudios a mayor número de poblaciones permitirá realizar mejores estimaciones de los niveles de flujo génico en esta especie, información de particular interés para la epidemiología de la FHA.