Rol de la heterooligomerizacion entre los receptores Mas de angiotensina-(1-7) y MrgD de alamandina

SILVA MG; RUKAVINA MIKUSIC NL; MAZZITELLI L; GOMEZ KA; GRECCO HE; GIRONACCI MM

Congreso; XXVII Congreso Argentino de Hipertensión Arterial; 2021

La angiotensina-(1-7) (Ang)-(1-7), a través del receptor Mas, y la alamandina (ALA), a través del receptor MrgD, ejercen efectos que llevan a una disminución de la presión arterial, oponiéndose al efecto presor de la Ang II. Recientemente se ha demostrado que Ang- (1-7) y ALA inducen efectos antiinflamatorios en ratones. Dado que tanto el RMas como el RMrgD pertenecen a la familia de receptores acoplados a proteínas G (RAPG), y que los RAPG heteromerizan con otros Rs afectando su funcionalidad, planteamos la hipótesis que la acción antiinflamatoria de ambos péptidos resultaría de la heteromerización RMas-RMrgD. Nuestro objetivo es investigar la heteromerización RMas-RMrgD y sus consecuencias funcionales. ALA y Ang-(1-7) indujeron una disminución en los niveles de IL 6 en células monocíticas humanas (THP-1) diferenciadas en macrófagos expuestos a LPS. La disminución de IL-6 inducida por ALA fue bloqueada por los antagonistas de RMasR y RMrgD, y cuando la expresión de RMasR se redujo por un siRNA. Esto sugiere una interacción de RMas-RMrgD, que fue confirmado mediante una co-inmunoprecipitación.Para evitar la influencia de otros Rs, se coexpresaron transitoriamente en células HEK293T el RMas fusionado con YFP y el MrgDR fusionado con m-cherry. El análisis de FRET mostró que MasR y MrgDR formaron un heterómero constitutivo, que no fue modificado por sus agonistas. Ang-(1-7) o ALA no tuvieron efecto sobre la fosforilación de Akt ni de ERK1/2 en células que expresaron los RMas o RMrgD solos, respectivamente. En contraste, ambos ligandos promovieron la activación tanto de Akt como de ERK1/2 en las células que coexpresaron los receptores, y este efecto fue prevenido por el antagonista del RMas. La Ang-(1-7) provocó un efecto antiproliferativo en las células que expresaron el RMas. La ALA no modificó la proliferación celular en las células que expresaron el RMrgD, sin embargo, indujo un efecto antiproliferativo en las células que expresaron ambos Rs. Nuestros resultados demuestran la existencia de heteromerización RMas-RMrgD, lo cual proporcionaría una explicación a los efectos antiinflamatorios y antiproliferativos de ALA.