Taninos Condensados en leguminosas del género Lotus.

ING. FRANCISCO ESCARAY; DRA. JULIA ESTRELLA; ING. JULIETA PESQUEIRA; DR. FERNANDO PIECKENSTAIN; DR. FRANCESCO DAMIANI; DR FRANCESCO PAOLOCCI Y DR. OSCAR A. RUIZ

Chascomús. Buenos Aires. Argentina

Taller; III Taller Interdisciplinario de Lotus spp y sus simbiontes; 2007

IIB-INTECH. Sede Chascomús (UNSAM-CONICET)

Los Taninos Condensados (TC) son metabolitos secundarios poli-fenólicos constituidos por unidades de flavan-3-ol, que presentan la característica de precipitar a las proteínas.  Para las especies de Lotus que son utilizadas como forrajeras, un contenido medio de TC (1-5 mg TC / gr MS) resulta benéfico ya que previene el meteorismo y se ha sugerido que ejerce un control sobre los parásitos intestinales. A su vez, “in planta” han sido relacionados con funciones de defensa contra el ataque de patógenos y también se ha sugerido que intervienen modulando los mecanismos de tolerancia frente al estrés abiótico y la nodulación .  Las especies del género Lotus presentan variación significativa en el contenido de TC entre sí e intra-población, tanto en hoja, como en tallo y en raíz. Dentro de ellas el Lotus tenuis es utilizado como forrajera en suelos alcalino- salinos de la Pampa Deprimida, donde se la considera una especie clave.  Entre los objetivos de nuestro trabajo, se encuentra el estudio de una posible interrelación entre los niveles de taninos y el estrés salino y la evaluación de si, eventuales modificaciones en las mismas, alteran el proceso de nodulación. Para ello trabajamos con especies utilizadas como forrajeras y/ó de importancia medioambiental (Lotus creticus, L. corniculatus y L. tenuis) así como también, con aquellas utilizadas como especies modelos en el proyecto de secuenciamiento genómico (L. burtii, L. filicaulis, L japonicus Gifu y L japonicus MG-20). Las poblaciones y líneas se sometieron a dos tratamientos: a) control y b) bajo estrés salino por aclimatación hasta alcanzar los 150 mM de ClNa.  Posteriormente se cosecharon 12 individuos por especie y por tratamiento y en cada uno se cuantificó el contenido de TC para la hoja, tallo y raíz por separado. Los valores se expresaron en Equivalentes Catequina (EC).  Bajo condiciones de estrés se observaron modificaciones significativas y contrastantes en el contenido foliar de TC de L. creticus y L. corniculatus. Asimismo, se puedo observar una diferencia significativa entre los distintos ecotipos de L. japonicus, pero sus concentraciones no presentaron diferencias significativas entre la situación control y salinizada. Interesantemente, estos mismos ecotipos presentaron también concentraciones diferentes de antocianinas en tallos. A su vez, el análisis del contenido de TC en tallos permitió observar un aumento de entre el 21 y el 28% para L. burtii y las dos poblaciones de L. japonicus y del 87 % para L. filicaulis bajo condiciones de estrés. En las mismas condiciones experimentales, en raíz se observó una disminución variable en el contenido de TC para L. burtii, L. japonicus y L. tenuis, mientras que por el contrario, en L. filicaulis se observó un aumento del 27 %. Para cumplir con el segundo objetivo se trabajó con genotipos de Lotus corniculatus transformados con el factor de transcripción SN1, el cual regula la transcripción de genes relacionados con la biosíntesis de taninos en maíz. Las líneas transgénicas obtenidas presentan concentraciones diferentes de TC en hoja y raíz entre sí y fueron inoculados al estadío de plántula, con dos cepas de crecimiento rápido (NZP 2213 y NZP 2037) y una cepa de crecimiento lento (NZP 2309). Como controles negativos se utilizaron los distintos genotipos sin inocular. Resultados preliminares sugieren que la nodulación efectiva es acompañada con una disminución en el contenido de TC en la raíz, mientras que en plántulas inoculadas con la cepa NZP 2309 (que forman nódulos no efectivos) se mantienen en niveles similares o ligeramente incrementados a los observados en los genotipos controles.