BECAS
ROSALES HURTADO Juan JosÉ
congresos y reuniones científicas
Título:
El interferón alfa controla la replicación de los alfaherpesvirus bovinos en células nerviosas.
Autor/es:
ROSALES, JUAN JOSÉ; BRUNNER, MARIA; MARIN, MAIA; PÉREZ, SANDRA
Lugar:
Rosario
Reunión:
Congreso; XXIII Jornadas de Ciencia y Tecnología de la Facultad de Ciencias Veterinarias UNR; 2024
Resumen:
El objetivo de este estudio fue determinar el efecto de la expresión del IFN-α en la replicación de BoAHV-1 y -5 en células neurales estimuladas con agonistas de los TLR3 y 7. Una suspensión de células de neuroblastoma (SH-SY5Y) se sembraron en placas de 24 pocillos con una concentración de 5x105 células/pocillo y se incubaron durante 24 hs a 37º C con 5% CO2, en D-MEM/F-12 con 10% SFB, este ensayo se realizó por triplicado. Transcurrido ese tiempo, las células se estimularon durante 1 hora con agonistas del TLR3 (Poly I:C; 10µg/µL) y del TLR7 (Imiquimod; 5µg/µL). Las células se infectaron a una MOI=1 con la cepa Cooper de BoAHV-1, 97/613 de BoAHV-5 y la cepa A663, un recombinante natural entre los dos tipos de virus. A las 0-4, 8 y 24 horas post-infección (hpi) se colectaron sobrenadantes y células para titulación viral en células MDBK. Los títulos se determinaron mediante el método de Reed y Muench y se expresaron como dosis infectiva en cultivo celular (DICC50/mL). Para promover la expresión génica las monocapas de células SH-SY5Y se estimularon con Poly I:C e Imiquimod. El ARN se extrajo a las 6 y 24 hpi. La expresión del mRNA del IFN-α se cuantificó por RT-qPCR, la estimulación se realizó por triplicado y la cuantificación de la expresión génica por duplicado. Se realizaron análisis de varianza y prueba de Tukey para determinar diferencias estadísticas entre los grupos infectados y de control. Se consideró estadísticamente significativo un valor de p < 0,05 para todas las pruebas. Los resultados de la cinética viral se analizaron ajustando un modelo lineal general tomando como variable respuesta el logaritmo de la variable explicativa del título viral, la cepa, el tiempo post-infección y la interacción cepa-tiempo. Los datos se presentan como media del error estándar.
