Determinación de nitrotirosina en placentas de ratas estresadas.

M.C ROMANINI; A. ROLANDO; M.C ROJO; L. TARDITI; C.A SOÑEZ; M.T MUGNAINI; L. PASTORINO; A. BOZZO; H.F GAUNA

Tafí del Valle, Tucumán

Jornada; XXIII Jornadas Científicas de la Asociación de Biología de Tucumán; 2006

Asociación de Biología de Tucumán

La placenta es un tejido extraembrionario transitorio que se desarrolla en conjunto con el embrión y es capaz de reflejar cualquier anomalía en el entorno materno, como por ejemplo, el efecto del estrés. La unidad feto-placentaria es un sistema endócrino que se asemeja al sistema hipotálamo-hipofiso-blanco, el cual se activa en respuesta al estrés para mantener la homeostasis materno-fetal. El estrés materno se traduce en una alteración del perfil oxidativo placentario. Las especies reactivas del oxígeno, entre ella el óxido nítrico (NO) son oxidantes de moléculas integrantes de las células, produciendo daños funcionales y estructurales de diversa severidad. Si el NO reacciona con los radicales libres del oxígeno se generan los peroxinitritos, considerados de alta toxicidad celular por su capacidad de nitrosilar las proteínas. Los peroxinitritos se combinan específicamente con el aminoácido tirosina de las proteínas de las membranas celulares formando la nitrotirosina la cual sería uno de los marcadores del daño celular que sufre el tejido por acción de las especies reactivas de oxígeno. Nuestro objetivo fue determinar la presencia de nitrotirosina en el tejido placentario de ratas gestantes estresadas, como marcador del estrés oxidativo. Se usaron placentas de ratas Wistar controles © y estresadas crónicamente (E) de 12 y 17 días de la preñez. El estrés crónico se logró por inmovilización en plancha durante 45 minutos/ 3 veces por semana. Los animales fueron sacrificados a los 12 y 17 de la preñez. Las placentas se fijaron en formaldehído /buffer fosfato durante 24 horas y se conservaron en alcohol 70º. Los cortes de tejido placentario se marcaron inmunohistoquímicamente con anticuerpo policlonal anti nitrotirosina de conejo 1/500. La presencia de nitrotirosina se evidenció en los endotelios de los vasos sanguíneos del laberinto placentario en placentas de madres estresadas el el día 17 de la preñez. En el día 12 de la preñez no se obtivieron marcas positivas. Concluimos que la ausencia de nitrotirosina a mediados de la preñez, probablemente está relacionada al escaso desarrollo de la zona del laberinto placentario, rica en vasos sanguíneos. Teniendo en cuenta que conjuntamente al desarrollo de la zona del laberinto placentario ocurren los procesos de angiogénesis y vasculogénesis con isquemia-reperfusión como consecuencia hay un incremento de las especies reactivas del oxígeno (entre ellas, los peroxinitritos). La detección de nitrotirosina en las placentas de la preñez avanzada reafirma el concepto de que el impacto oxidativo en el tejido placentario se pone en evidencia en los últimos días de la gestación en las ratas estresadas cronicamente por inmovilización.