INFLUENCIA DE DIFERENTES FUENTES DE NITRÓGENO EN LA SECRECIÓN DE CELULASAS EN CULTIVO SOLIDO EN CEPAS DE TRICHODERMA NATIVAS DE MISIONES

CASTRILLO, M. L.; IRRAZÁBAL, S.; BARENGO, M.; RODRÍGUEZ, M. D.; ZAPATA, P. D.; VILLALBA, L. L.

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Congreso; XIII Congreso Argentino de Micología 2014, XXIII Jornadas Argentinas de Micología, 1ra. Reunión de la Asociación Micológica Carlos Spegazzini; 2014

Asociación Micológica Carlos Spegazzini

El uso indiscriminado de combustibles fósiles no renovables produce gases muy contaminantes para el ecosistema, es por ello que en la actualidad se encuentra en auge la producción de biocombustibles a partir de sustratos lignocelulósicos capaces de ser aprovechados utilizando complejos enzimáticos que hidrolizan la celulosa en monosacáridos de glucosa. Estos complejos se componen de tres grupos de enzimas: endo-1,4 β-glucanasas, exoglucanasas y β-glucosidasas. Los hongos del género Trichoderma poseen distribución cosmopolita y amplia plasticidad ecológica, siendo capaces de hidrolizar la celulosa de residuos agroindustriales a glucosa para su posterior conversión a bioetanol mediante fermentación. Por tanto, las fuentes de carbono y nitrógeno utilizadas pueden influir de manera significativa en la secreción enzimática. El medio Mandels es una de las fuentes de nitrógeno orgánico más utilizadas como complejo nitrogenado completo. El objetivo de este trabajo fue evaluar la influencia de fuentes de nitrógeno orgánicas para inducir una mayor secreción de celulasas mediante cultivo sólido en cepas de Trichoderma nativas de Misiones. Se trabajó con dos cepas de Trichoderma aisladas y seleccionadas en el Laboratorio de Biotecnología molecular (NAN 13 y TEYU 14). Para cada cepa, se ensayaron diferentes sustratos sólidos conteniendo cascarilla de arroz como fuente de carbono y diferentes fuentes nitrogenadas orgánicas (urea, extracto de levadura, sulfato de amonio y complejo nitrogenado Mandels) seleccionadas por bibliografía. Para cada ensayo se inocularon 1x107 esporas/mL, y se incubaron a 28°C ±1 con luz continua por 5 días. Cada 24 h se tomaron alícuotas para determinación enzimática. Las actividades endo-1,4 β-glucanasas y β-exoglucanasas se determinaron por el método del ácido 3,5-dinitrosalicílico, la actividad β-glucosidasa por el ensayo del p-nitrofenil- β-D-glucopiranósido y la actividad sinérgica del complejo con el ensayo de Papel de Filtro. Los análisis de varianza fueron evaluados con el programa GraphPad Prisma 6.0. Para ambas cepas de Trichoderma, la fuente de nitrógeno conteniendo el complejo nitrogenado Mandels presentó la mayor actividad enzimática celulolítica. Se puede inferir que el incremento en la secreción de celulasas se obtiene mediante la combinación de diferentes fuentes de nitrógeno, y no por cada una por separado; ya que dicho complejo está compuesto principalmente por urea, extracto de levadura y sulfato de amonio.