OBTENCIÓN DE FRAGMENTOS GÉNICOS DE CELOBIOHIDROLASAS EN CEPAS DE Trichoderma SP AISLADOS EN MISIONES

CASTRILLO, M. L.; AMERIO, N. S.; FONSECA, M. I.; RODRÍGUEZ, M. D.; SCIOLI, G. A.; VILLALBA, L. L.; ZAPATA, P. D.

Rosario

Congreso; XV Congreso Latinoamericano de Genética; 2012

Sociedad Argentina de Genética

La bioconversión de celulosa a etanol a través de las enzimas celulasas ha surgido como una alternativa potencial para reducir el uso de combustibles fósiles y la polución ambiental, pero el alto costo de producción ha obstaculizado su aplicación industrial. Un posible camino es profundizar los conocimientos sobre las características bioquímicas y moleculares de los sistemas enzimáticos de microorganismos productores de celulasas para favorecer el empleo de diferentes estrategias biotecnológicas como sobreexpresión del gen, clonado, expresión heteróloga, etc. En este sentido los hongos del género Trichoderma secretan un conjunto de enzimas celulasas que actúan sinérgicamente para hidrolizar la celulosa. Dentro de tales enzimas, las celobiohidrolasas (CBH) son las más abundantes del conjunto. Nuestro objetivo fue obtener un fragmento génico de la enzima celobiohidrolasa I mediante cebadores degenerados a partir de Trichoderma sp. Se diseñaron cebadores degenerados sobre regiones conservadas en base a secuencias proteicas y conocidas de CBHI en ascomicetes. Luego de la amplificación los fragmentos génicos fueronpurificados y secuenciados. La secuencia obtenida en Trichoderma sp. arrojó una identidad máxima del 95% con el gen de celobiohidrolasa (cbh1) de Trichoderma harzianum, por tanto nuestro fragmento pudo reconocerse como un nuevo miembro de las celobiohidrolasas.