gPAT ES LA ACIL-TRANSFERASA INVOLUCRADA EN EL CONTROL DE LA PALMITOLACIÓN DE PROTEÍNAS DE SUPERFICIE Y DE LA CITOTOXICIDAD EN GIARDIA.

RIVERO MR; CONRAD JT; NASH TE; LUJAN HD; TOUZ MC

Villa Giardino, CORDOBA

Congreso; SOCIEDAD DE BIOLOGIA DE CORDOBA; 2005

SBC

El protozoario parásito Giardia lamblia cambia espontáneamente la expresión de sus proteínas de superficie o VSPs (Variant-specific Surface Proteins) en un proceso denominado variación antigénica. El mecanismo por el cual los trofozoítos cambian su cubierta no se conoce, pero se cree que le permite a Giardia adaptarse a la respuesta inmune del hospedador y con ello producir infecciones crónicas y recurrentes. Las VSPs son proteínas de membrana tipo I y poseen una secuencia hidrofóbica conservada seguida de cinco aminoácidos (CRGKA) invariables en su extremo C-terminal citoplasmático. Utilizando trofozoítos de Giardia transfectados con VSPH7 e incubados con [3H]ácido palmítico, hemos demostrado que el aminoácido cisteína (C) de la cola citoplasmática CRGKA une palmitato. Mutantes de VSPH7 que carecen del aminoácido cisteína o de la cola citoplasmática no son palmitoladas y se encuentran en la membrana plasmática del trofozoíto. Sin embargo, a diferencia de la proteína nativa, dichas mutantes no se encuentran localizadas en dominios raft y son incapaces de mediar citotoxicidad anticuerpo-especifica. Las enzimas encargadas de la palmitolación de proteínas se denominan palmitoil-transferasas (PAT) o acil-transferasas y poseen un motivo DHHC rico en cisteína en su sitio activo. En Giardia, hemos encontrado una proteína de 50 kDa que contiene el motivo DHHC y a la que llamamos gPAT. La expresión de una proteína de fusión gPAT-V5 mostró localización en la membrana plasmática de trofozoítos presentando un patrón similar al de las VSPs. Inhibición de la expresión de gPAT mediante la utilización de RNA antisentido disminuyó notablemente la palmitolación de VSPs tanto in vitro como in vivo. Nuestros resultados muestran que gPAT es responsable de la palmitolación de las VSPs en la cisteína presente en la cola citoplasmática invariable. Si bien no es clara la función biológica de la palmitolación, su presencia en la región conservada de las VSPs y su participación en el anclaje a dominios raft de la membrana plasmática, sugieren una función esencial en el control de señales que regulan la expresión y procesamiento de las proteínas de superficie en Giardia.