SUBGENOTIPOS DE CRYPTOSPORIDIUM PARVUM EN TERNEROS DE TAMBOS DE LA CUENCA LECHERA DE VILLA MARÍA, CÓRDOBA

LOMBARDELLI J; TOMAZIC M; SCHNITTGER L; TIRANTI KI; RIVERO MR*

RIO CUARTO

Jornada; XXV JORNADAS CIENTÍFICAS SOCIEDAD DE BIOLOGÍA DE CÓRDOBA; 2022

Sociedad de Biología de Córdoba

03-2BA-1. La cryptosporidiosis es una enfermedad muy frecuente en terneros de crianza artificial de tambos y puede causar diarreas severas, generando cuantiosas pérdidas económicas. De las dos especies de Cryptosporidium más comúnmente aisladas en los terneros predestete de tambo, Cryptosporidium parvum es la única especie aislada en los terneros de tambo de Argentina y asociada a la diarrea neonatal. La caracterización molecular de C. parvum a nivel de subgenotipos en terneros es importante para determinar el potencial zoonótico. Además, diferentes manifestaciones clínicas han sido demostradas en humanos dependiendo de la especie y subgenotipo presente, no encontrándose dicha asociación en terneros de tambo hasta la actualidad. El objetivo del presente trabajo fue determinar los subgenotipos de C. parvum más frecuentes en terneros con diarrea. Los establecimientos (n=60), fueron seleccionados al azar. Encada establecimiento se extrajo una muestra de materia fecal a todos los terneros menores de 60 días de vida. Las muestras de materia fecal fueron tomadas directamente del recto y colocadas en conservadora (≤ 8°C). Se determinó clínicamente la presencia de diarrea al momento de tomar la muestra. Las muestras se procesaron con las técnicas de Tellemann y Ziehl-Neelsen modificada. Posteriormente, las muestras positivas se procesaron y analizaron mediante PCR-RFLP para determinar las especies presentes. Para realizar la subtipificación de C. parvum se seleccionaron las muestras de terneros con diarrea. Se amplificó el gen de la glicoproteína de 60kDa (GP60, 878pb) (Alves et al., 2003). Los productos de PCR fueron secuenciados en ambas direcciones utilizando los mismos iniciadores (Macrogen Inc, Corea). Los cromatogramas de las secuencias obtenidas fueron alineadas y examinados con el programa Vector NTI (InforMax Inc, USA). Los subgenotipos de C. parvum fueron designados basados en el número de trinucleótidos TCA y TCG, y de hexanucleótido ACATCA repetidos en la región microsatélite del gen GP60. Las secuencias de nucleótidos fueron depositadas en la base de datos GenBank, con los números de acceso KX768771-KX768816. Del total de 1073 muestras recolectadas, 274 (25,5%) fueron positivas. C. parvum fue la única especie encontrada. 47 muestras de terneros con diarrea y positivas a C. parvum se seleccionaron para la amplificación y secuenciación del gen GP60. Cinco subgenotipos GP60 C. parvum fueron identificados. El subgenotipo predominante en terneros con diarrea fue IIaA20G1R1 (25/47), seguido por IIaA18G1R1 (12/47). Además, un nuevo subgenotipo no anteriormente descrito, IIaA24G1R1 fue aislado de dos terneros. El subgenotipo más frecuentemente aislado en terneros con diarrea fue IIaA20.