La acción diferencial de deoxicolato de sodio y de ácido ursodeoxicólico sobre la absorción intestinal de calcio involucra cambios de estado redox y del metabolismo energético mitocondrial

MARCHIONATTI AM; RIVOIRA M; RODRÍGUEZ V; PEREZ A; TOLOSA DE TALAMONI N

Bs As

Congreso; XXXIV Reunión Anual de AAOMM; 2017

Los ácidos biliares (AB) primarios se sintetizan en el hígado a partir del colesterol y se vuelcan al intestino adonde se transforman en AB secundarios por acción de la flora intestinal. El ácido deoxicólico o su sal sódica el deoxicolato de sodio (DXCNa) es el principal AB secundario en humanos. En el colon también se forma el ácido ursodeoxicólico (UDCA) por acción bacteriana. Nosotros demostramos que el DXCNa inhibe la absorción intestinal de Ca+2 mediante desencadenamiento de estrés oxidativo y apoptosis (Rivoira y col., 2012), mientras que el UDCA favorece la absorción intestinal de Ca+2 y, en presencia de DXCNa, evita los efectos adversos del último (Rodríguez y col., 2013, 2016). Dado que la absorción intestinal de Ca+2 es un proceso que requiere energía, nuestra hipótesis fue que el efecto diferencial de DXCNa y UDCA podría ser debido a que estos AB modifican de manera opuesta el estado redox y el metabolismo energético en las mitocondrias intestinales. Para comprobar esto se utilizaron ratas Wistar machos adultas divididas en: 1) controles, 2) tratadas con DXCNa 10 mM 3) tratadas con UDCA, 60 µg/100g peso corporal y 4) tratadas con NaDOC+UDCA. Los AB se administraron por vía luminal durante 30 minutos. Las mitocondrias duodenales se aislaron por centrifugación diferencial. En los sobrenadantes de los extractos mitocondriales se determinaron por espectrofotometría el contenido total de glutatión (GSH) y las actividades de malato deshidrogenasa (MDH-NAD), isocitrato deshidrogenasa (ICDH) y superóxido dismutasa (SOD). En suspensiones mitocondriales se midieron el contenido de anión superóxido (.O2-), los grupos carbonilos proteicos y la actividad de citrato sintasa (CS). Además se determinaron las actividades de los complejos de la cadena respiratoria (CR): NADH-ubiquinona reductasa (CI), succinato-ubiquinona reductasa (CII) y ubiquinona- citocromo C reductasa (CIII). Los datos se analizaron mediante ANOVA y el test de Bonferroni como prueba post hoc. Los resultados indican que el DXCNa disminuyó el contenido total de GSH e inhibió las actividades de las enzimas MDH-NAD e ICDH, mientras que el tratamiento combinado bloqueó los efectos inhibitorios producidos por DXCNa. De por sí, UDCA incrementó la actividad de ICDH. La actividad de SOD, el contenido de .O2- y de grupos carbonilos proteicos incrementaron con el DXCNa, efectos que se abolieron en presencia de UDCA. Con respecto a la actividad de los complejos de la CR, DXCNa disminuyó la actividad del CIII, lo cual no se observó con el tratamiento combinado. Por otro lado, UDCA aumentó la actividad del CII con respecto a la de los grupos control y tratado con DXCNa. Las actividades de CS y del CI no presentaron modificaciones con ninguno de los tratamientos. En conclusión, la disminución de la absorción intestinal de Ca+2 causada por DXCNa involucra depleción del funcionamiento de las enzimas del ciclo de Krebs y del CIII de CR, indicadores de menor síntesis de ATP. Esto podría deberse a desencadenamiento de estrés oxidativo mitocondrial a juzgar por el incremento de grupos carbonilos y del .O2-, así como el aumento en la actividad de SOD y la disminución de GSH. Por el contrario, el estímulo de la absorción intestinal del catión por UDCA puede ser explicado por el incremento del metabolismo energético mitocondrial, como lo sugiere el aumento de la actividad de ICDH y del CIII de CR.