La infección crónica por Staphylococcus aureus modifica la expresión de lactoferrina en la glándula mamaria bovina durante la involución.

PEREYRA, E.A.L.; ANDREOTTI, C.S.; BARAVALLE, C.; CALVINHO, L.F.; DALLARD, B.E.

Esperanza, Santa Fe

Jornada; XII Jornadas de Divulgación Técnico Científicas en Ciencias Veterinarias. Jornada Nacional del Divulgación Técnico Científica.; 2011

Facultades de Ciencias Veterinarias, Universidad Nacional del Rosario y Universidad Nacional del Litoral.

La mastitis bovina es una enfermedad infecto-contagiosa de la glándula mamaria, en la cual la inflamación se produce como respuesta a la invasión, a través del canal del pezón, de diferentes tipos de patógenos. El agente de mayor prevalencia asociado con la infección es Staphylococcus aureus, organismo más frecuentemente aislado en casos de mastitis en la Argentina2. La infección por este microorganismo comienza con un episodio subclínico o clínico agudo, generalmente evoluciona hacia la cronicidad y puede persistir a lo largo de toda la vida del animal. La eficacia de curación en casos crónicos luego del tratamiento con antibióticos es baja y no existe una terapia efectiva para eliminar por completo la infección en el animal. Trabajos previos han postulado que la persistencia de la infección por S. aureus se asocia con una respuesta inmune deficiente mediada por factores de origen bacteriano y del hospedador1. El sistema de defensa de la glándula mamaria contra los patógenos causantes de mastitis está mediado por factores inmunológicos innatos y adquiridos asociados a este tejido, que actúan en forma coordinada, siendo la eficiencia de estos mecanismos la que determina la resistencia a nuevas infecciones. Los factores solubles involucrados en la inmunidad innata son principalmente proteínas e incluyen, entre otros, a la lactoferrina. La lactoferrina bovina (LFb) es una glicoproteína multifuncional que posee habilidad para unirse al hierro y se localiza en diversas secreciones, entre ellas la leche. Esta proteína está presente en los gránulos secundarios de los leucocitos polimorfonucleares y es sintetizada por las células epiteliales de la glándula mamaria bovina3. Se ha demostrado que las concentraciones de LFb se incrementan durante la involución mamaria y en infecciones subclínicas4. Teniendo en cuenta los antecedentes planteados, el presente trabajo propone investigar la respuesta inmune generada por el huésped en infecciones crónicas de la glándula mamaria bovina causadas por S. aureus durante la involución, a través de la identificación y cuantificación de LFb por inmunohistoquímica (IHQ), comparando  entre animales infectados y libres de infección. Se utilizaron 6 vacas Holando Argentino no preñadas en la etapa final de la lactancia. Se seleccionaron cuartos libres de infección intramamaria y cuartos con infecciones crónicas por S. aureus. El estado de infección de los cuartos fue determinado seis meses antes de la iniciación del experimento y confirmado 20 días antes del secado a través de cultivos bacteriológicos de muestras de secreción mamaria. La unidad experimental fue el cuarto mamario. Luego del último ordeño los animales fueron secados y se sacrificaron en un matadero local a tiempos controlados (7, 14 y 21 días de la involución). Se obtuvieron muestras de tejido mamario y se procesaron mediante técnicas histológicas de rutina. Cortes de 4 um de espesor fueron sometidos a técnicas de IHQ utilizando un anticuerpo policlonal específico para la detección de LFb. Para la cuantificación se utilizó el Software Image Pro-Plus 3.0.1., determinándose el porcentaje de área inmunomarcada. El análisis de los datos se realizó por ANOVA de dos vías utilizándose el Software SPSS. La expresión de LFb se vio significativamente influenciada por el periodo de la involución evaluado, tanto en los cuartos provenientes de animales infectados como en los libres de infección intramamaria (p<0.01). La expresión de LFb fue significativamente menor en cuartos con infecciones crónicas que en cuartos sanos (p<0.01). En ambos grupos evaluados (infectados y libres de infección) los porcentajes de inmunomarcación para la LFb aumentaron desde el día 7 hasta día 14 de la involución, disminuyendo en forma significativa al día 21 en los cuartos mamarios con infecciones crónicas (p<0.01). Los resultados obtenidos muestran una respuesta inmune disminuida en los animales con infecciones crónicas por S. aureus que se hace evidente a medida que transcurre la involución mamaria. La menor expresión de LFb observada en los animales infectados podría ser un factor a considerar en la patogenia de la infección crónica por S. aureus. Un mayor entendimiento a cerca de la respuesta inmune de la glándula mamaria hacia agentes etiológicos particulares y la adaptación bacteriana al ambiente de la misma, podrían aportar nuevos datos para el desarrollo de alternativas no antibióticas para el control de la mastitis bovina.   (1) Barkema, H.W.; Schukken, Y.H.; Zadoks, R.N. The role of cow, pathogen, and treatment regimen in the therapeutic success of bovine Staphylococcus aureus mastitis. J. Dairy Sci. 89:1877-1895, 2006. (2) Calvinho, L.F.; Tirante, L. Prevalencia de microorganismos patógenos de mastitis bovina y evolución del estado de salud de la glándula mamaria en Argentina en los últimos 25 años. Revista FAVE Sección Ciencias Veterinarias. 4:29-40, 2005. (3) Hurley, W.L.; Rejman, J.J. Bovine lactoferrin in involuting mammary tissue. Cell Biol. Int. 17:283–289, 1993. (4) Molenaar, A.J.; Kuys, Y.M.; Davis, S.R.; Wilkins, R.J.; Mead, P.E.; Tweedie J.W. Elevation of lactoferrin gene expression in developing, ductal, resting, and regressing parenchymal epithelium of the ruminant mammary gland. J. Dairy Sci. 79:1198–1208, 1996.