IMBIV   05474
INSTITUTO MULTIDISCIPLINARIO DE BIOLOGIA VEGETAL
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
REGULACIÓN EPIGENÉTICA DE LA FITOPATOGENICIDAD Y DEL METABOLISMO SECUNDARIO EN FUSARIUM VERTICILLIOIDES
Autor/es:
BEATO, M; CAÑIZARES, M. C; GARCÍA-PEDRAJAS, M. D.; JACQUAT, A. G; PEREIRA, A; ARENA J. S.; DAMBOLENA, JOSÉ SEBASTIÁN; PODIO N.; ARECO V; KRAPACHER C.
Lugar:
Córdoba
Reunión:
Jornada; XXII JORNADAS CIENTÍFICAS Sociedad de Biología de Córdoba; 2019
Resumen:
Introducción: Fusarium verticillioides es un hongo fitopatógeno de alta incidencia en maíz e importante productor de micotoxinas como las fumonisinas (FBs), lo que genera consecuencias socioeconómicas y toxicológicas de consideración. Aunque a la fecha los avances en la determinación del mecanismo de biosíntesis de FBs han sido muy importantes, los estudios sobre la dilucidación de los factores que inducen su producción son más escasos. Numerosa evidencia sobre la regulación epigenética de la expresión de clusters de genes del metabolismo secundario fúngico (MSF) a partir de cambios la conformación de la cromatina, ha sido reportada en diferentes especies fúngicas. Así, se conoce que la familia Hep1 (heterochromatin protein 1) de proteínas no-histónicas está involucrada en el establecimiento de la heterocromatina, y que el silenciamiento de éstas afecta el MSF, sin embargo no hay antecedentes en F. verticillioides. Objetivos: El presente trabajo tiene por objetivo delecionar el gen homologo putativo de Hep1 en F. verticillioides y evaluar la producción MSF (FB1 y pigmentos), caracteres vegetativo in vitro¸ aspectos morfológicos y la fitopatogenicidad. Materiales y métodos: En primer lugar se logró la efectiva deleción del gen homologo putativo de Hep1 (anotado como FVEG_01876.3) siguiendo el método One Step Construction of Agrobacterium-Recombination-ready-plasmids (denominación: Fv∆hep1, y el control: Fv∆hep1-Ectópica, FvEct). Las cepas se cultivaron en medio GYAM y CDB. La cuantificación de FB1 se realizó con HPLC con detector de fluorescencia y el perfil de pigmentos se obtuvo mediante HPLC-MS-MS. Para los ensayos in vitro (crecimiento de colonia y conidiación) se usaron medio de cultivo CDA, y para la morfología del micelio se las cultivó en CLA y se realizaron micrografías de microscopía electrónica de barrido. Los ensayos de fitopatogenicidad se realizaron en cultivos hidropónicos en fitotrón de plántulas de maíz infectadas con Fv∆hep1 y FvEct. Resultados y discusión: La cepa mutante Fv∆hep1 produce una menor cantidad de FB1 y una mayor cantidad de pigmentos con respecto a la cepa control y a F. verticillioides silvestre. Esta mutante, también posee una menor tasa de crecimiento radial de la colonia y menor producción de conidias. A su vez las micrografías indicaron una alteración morfológica en sus hifas y conidias. Esto concuerda con la determinación visual de que Fv∆hep1 produce un micelio aéreo reducido y/o aplastado sobre la superficie del medio. Finalmente, Fv∆hep1 mostró una fitopatogenicidad reducida. Conclusión: Los resultados aquí expuestos representan la primer evidencia sobre la participación de la proteína Hep1 en la regulación del MSF de F. verticillioides, y en aspectos de crecimiento y reproducción vegetativa que estarían repercutiendo en la fitopatogenicidad. Estos hallazgos representan un aporte muy significativo para la comprensión integral de los mecanismos de regulación epigenética en patógenos fúngicos y en la identificación de puntos blancos para controlar patologías fúngicas.