Identificacion de antigenos inmunodominantes para el desarrollo de formulaciones vacunales contra la criptosporidiosis bovina

TOMAZIC ML; LOMBARDELLI JA; POKLEPOVICH T; RODRIGUEZ A; ROXANA G; TOLEDO J; GARRO C; TIRANTI K; FLORIN-CHRISTENSEN M; SCHNITTGER L

Jornada; IX Jornadas y Reunión Anual de la Asociación Argentina de Inmunología Veterinaria (AAIV); 2017

El protozoo apicomplexaCryptosporidiumparvum es un agente causal de diarreas en bovinos yhumanos. Dado que no existen vacunas, es esencial la búsqueda de antígenos parael desarrollo de formulaciones vacunales. Las proteínas ancladas a lasuperficie parasitaria por puentes glicosilfosfatidilinositol(GPI) están implicadas en la invasión, por lo que constituyen potencialescandidatos vacunales. En nuestro trabajo, el proteoma anclado por GPI de C. parvum fue identificadobioinformáticamente y tres de las proteínas, Cph1, Cpgp60 y Cpsubl, fueron expresadas en E.coli y purificadas por cromatografíade afinidad. Mediante inmunoblots, las proteínas fueron enfrentadas a sueros debovinos (n=12) naturalmente infectados con Cryptosporidiumsp., obtenidos entre los días 1 y 52 de vida. Se detectaron anticuerpos contra los tres antígenos entodos los bovinos analizados, demostrando que (i) las proteínas son expresadasen el parásito; (ii) tienen epitopes B conservados entre aislamientos y (iii)son inmunodominantes. La detección de anticuerpos específicos en etapastempranas (1 a11 días) sugiere la transferencia de anticuerpos calostrales. Sin embargo, losdatos de refractometria no permitieron confirmar este tipo de transferencia. Nose encontró asociación entre presencia de anticuerpos contra estos antígenos ydiarrea. La conservación de epitopes B predichos fue confirmada para dos de losantígenos mediante amplificación de los genes codificantes por PCR apartir de ADN genómico de 5 aislamientos geográficos y 3 subgenotipos, seguido de secuenciación directa y análisis in silico. En etapas futuras se ensayaránestos antígenos en formulaciones vacunales contra la criptosporidiosis bovina.Financiamiento: FonCyt, PICT-2013-1708 y PICT 0695-2012;INTA, PNBIO-1131034 y PNSA-1115053; Fundación Universidad de Morón PID8-2015.