Identificación y caracterización de proteínas con anclas de glicosilfosfatidilinositol (GPI) en diferentes especies de ciliatos de Tetrahymena

MONTE MG; ELGUERO E; NUDEL CB; SCHNITTGER L; NUSBLAT AD

Congreso; XXVII Reunión Anual Sociedad Argentina de Protozoología; 2015

En las células eucariotas muchas proteínas de membrana se encuentran ancladas por medio de puentes de glicosilfosfatidilinositol (GPI). Particularmente, en ciliados como Tetrahymena thermophila y Paramecium tetraurelia, el grupo más representativo de esta clase de proteínas corresponde a los i-antígenos, denominados antígenos de inmovilización en base a sus propiedades inmunológicas, que son expresadas en la membrana plasmática bajo ciertas condiciones de composición de medio de cultivo y temperatura de incubación. T. thermophila expresa diferentes tipos de i-antígenos, entre los que se encuentran los H, T y S, pero cuya función no ha sido establecida hasta el momento. Análisis preliminares, con fracciones enriquecidas en proteínas con anclas GPI obtenidas mediante partición en dos fases con detergentes y posterior análisis por espectrometría de masa, nos han permitido identificar en T. thermophila una proteína del tipo GPI de aproximadamente 30 kDa, que pertenece a la familia SerH. El objetivo de este trabajo es identificar y evaluar la expresión de proteínas ancladas a la membrana por GPI tanto en T. thermophila como en otras especies poco estudiadas hasta ahora como ser T. borealis, T. malaccensis, T. pigmentosa y T. elliotti mediante la metodología comentada. Además, se emplearan herramientas bioinformáticas para dilucidar su vía de síntesis e identificar las enzimas involucradas en la misma, ya sea en los pasos de formación del ancla GPI, que podrían tener como precursores a la UDP-GlcNAc y al fosfatidilinositol, como en el anclaje al extremo C-terminal de la proteína. Este proyecto fue subsidiado por PNSA 1115053 de INTA, PICT 2013-1708 de ANPCyT y PID 8-2015 de la FUM.