Desarollo de una PCR semianidada duplex para la detección de ADN de Sarcocystis aucheniae en muestras de sangre de Llama

DECKER C; SCHNITTGER L; FLORIN-CHRISTENSEN M

Congreso; XXVII Reunión Anual Sociedad Argentina de Protozoología; 2015

La sarcocistiosis de camélidos sudamericanos (CS) domésticos es causada por el protozoo Sarcocystis aucheniae, que da lugar a la formación de quistes macroscópicos (1-5 mm) en los músculos de estos animales. El consumo de carne infectada, cruda o insuficientemente cocida, puede producir en el hombre, un cuadro de gastroenteritis que cursa con náuseas, diarreas y cólicos. En consecuencia, la sarcocistiosis tiene un impacto negativo en la economía de los productores de CS, dado que la presencia de quistes puede conducir a la desvaloración y/o decomiso de la carne. Para ayudar al control de esta parasitosis, es importante contar con métodos de detección de las infecciones previamente a la faena. Por ello, el objetivo de este trabajo fue el desarrollo de una PCR semianidada dúplex, para detectar simultáneamente ADN del parásito y del hospedador en muestras de sangre. Como secuencias blanco, se utilizaron secuencias específicas del gen 18S ARNr de S. aucheniae y el gen 16S ARNr mitocondrial de llama. El ensayo se puso a punto con muestras de ADN extraídas de quistes del parásito y músculo de llama, para luego ser aplicado a alícuotas de sangre de llama a las que se agregaron distintas cantidades conocidas de bradizoitos de S. aucheniae. En el segundo ciclo de la PCR, se obtuvieron fragmentos de ADN correspondiente al tamaño esperado para el parásito y hospedador, 583 y 257 pb, respectivamente. Éste método fue altamente sensible, alcanzándose un límite inferior de detección de 0,76 parásitos/ml de sangre. Luego, fue aplicado con éxito a muestras de sangre de llamas de Argentina, confirmando así la posibilidad de detectar infecciones por S. aucheniae en la sangre de CS. Este método permitirá un relevamiento de infecciones por este parásito en CS de Argentina y países vecinos, criados bajo diferentes condiciones sanitarias, para poder conocer la situación epidemiológica de la sarcocistiosis de CS e identificar factores de riesgo. Financiado por INTA SALJU-1232204.