Identificacion de microsatelites como marcadores genomicos en las regiones intergenicas de Babesia bovis

FLORES D, MINICHIELLO Y, DELLA ROSA MM, BENITEZ D, ECHAIDE I, FLORIN-CHRISTENSEN M, SCHNITTGER L

Congreso; XL Congreso Argentino de Genetica; 2011

IDENTIFICACIÓN DE MICROSATÉLITES COMO MARCADORES GENÓMICOS EN LAS REGIONES INTERGÉNICAS DE Babesia bovis Flores1 D, Y Minichiello1, MM Della Rosa2, D Benitez2, I Echaide3, M Florin-Christensen1,4, L Schnittger1,4 1CICVyA, INTA-Castelar, Buenos Aires, Argentina; 2 INTA-EEA Mercedes, Corrientes, Argentina; 3 INTA-EEA Rafaela, Santa Fe, Argentina; 4 CONICET, Argentina; e-mail: lschnittger@cnia.inta.gov.ar Las infecciones por el hemoprotozoo Babesia bovis son una importante limitante para la ganadería de regiones cálidas. La tipifi cación molecular de aislamientos del parásito utilizando secuencias repetitivas (STR) puede aportar al control de esta parasitosis. En un trabajo previo se desarrolló un sistema de 14 STRs, de los cuales solo 2 eran microsatélites (Perez-Llaneza et al. Vet. Parasitol. 167:196-204, 2010). El objetivo del presente estudio fue la búsqueda específi ca de microsatélites ubicados en las regiones intergénicas de B. bovis, para ser incorporadas al mencionado sistema. Para ello,las regiones intergénicas del genoma de B. bovis, cepa T2B, se analizaron utilizando la base de datos TRDB, con parámetros relajados. Se encontraron 14 microsatélites, y se investigó su amplifi cación específi ca por PCR utilizando ADN de cinco cepasde referencia americanas. Los productos se corrieron en geles de agarosa de alta resolución y en geles de poliacrilamida en condiciones desnaturalizantes.En los primeros, 6 de los STRs identificados amplifi caron en todas las cepas, mostrando entre 1 y 3 alelos cada uno. En cambio, en los geles de poliacrilamida se observaron 7 STRs positivos para todos los aislamientos, presentando de 2 a 4 alelos. Además, 2 STRs permitieron diferenciar las cepas M1A (atenuada) y M2P (patógena), originarias dela misma región de Argentina. Como conclusión, seleccionamos 7 STRs para sumar al set ya descripto en el laboratorio, los cuales serán utilizados para la tipifi cación de aislamientos de B. bovis de distintas regiones geográfi cas. Financiado por INTA (AESA- 203961) y la Comisión Europea (INCO 245145 PIROVAC)