INVESTIGADORES
PEICHOTO Maria elisa
congresos y reuniones científicas
Título:
Estudio comparativo de la actividad citotóxica de los venenos de las serpientes opistoglifas
Autor/es:
FLÁVIO L. TAVARES; MATÍAS N. SÁNCHEZ; ALEJANDRO TIMONIUK; WALTER VERÓN; LAURA REY; OFELIA ACOSTA; MARÍA E. PEICHOTO
Lugar:
Corrientes
Reunión:
Encuentro; Comunicaciones Científicas y Tecnológicas de la UNNE 2011; 2011
Institución organizadora:
Universidad Nacional del Nordeste
Resumen:
Las serpientes opistoglifas representan desde el punto de vista filogenético uno de los grupos de vertebrados terrestres más primitivos que se difundieron ampliamente por todo el planeta. Aunque el veneno de estas serpientes puede provocar daños locales y/o sistémicos cuando ocurren accidentes en humanos, y aunque represente también una fuente potencial y aún inexplorada de substancias bioactivas, los estudios que investigan su composición y actividad biológica son escasos en todo el mundo. Así en el presente trabajo se investigó de modo comparativo la actividad citotóxica in vitro, frente a fibroblastos 3T3, de los venenos de Philodryas patagoniensis (Pp), una serpiente opistoglifa extensamente distribuida en América del Sur y en especial en Argentina, y de Trimorphodon biscutatus lambda (Tbl), una especie opistoglifa natural de Norte América. A tal efecto, el veneno de Pp se extrajo de especímenes capturados en la región nordeste de Argentina y mantenidos en cautiverio en el serpentario del Zoológico de la ciudad de Corrientes. A su vez, el veneno de Tbl se obtuvo a partir de especímenes capturados en Colorado y Arizona (USA), y mantenidos en cautiverio en el bioterio de la Universidad del Norte del Colorado (donación del Dr. S.P. Mackessy). Previo a los ensayos, ambos venenos fueron disueltos en solución salina tamponada con fosfato 0,01 M (PBS), pH 7.4, y filtrados a través de un filtro Millipore (0,22 µm) para remover material insoluble y esterilizar. Los ensayos de citotoxicidad se llevaron a cabo mediante incubación de fibroblastos (línea celular 3T3), en placa de 96 pozos, con crecientes concentraciones de los respectivos venenos, por el tiempo de 72 horas. Luego de este período, se realizó el ensayo de MTT (bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-yl)-2,5-difeniltetrazolio) para evaluar la citotoxicidad y/o la proliferación celular de fibroblastos frente al tratamiento con los venenos de Pp y Tbl. Los resultados mostraron que el veneno de Pp induce una respuesta 100% citotóxica hasta una concentración de 12,5 µg/mL, mientras que el veneno total de Tbl presenta una respuesta más compleja. En las concentraciones más altas testadas (a partir de 24 µg/mL), este veneno presentó actividad citotóxica. Sin embargo, en las concentraciones más bajas testadas, el veneno de Tbl estimuló la proliferación de fibroblastos. En conclusión, tanto el veneno de la serpiente opistoglifa sudamericana como el de la especie de Norte América son citotóxicas contra fibroblastos murinos. La proliferación celular promovida por el veneno de la especie norte americana muestra un efecto dosis dependiente de carácter bifásico (un efecto denominado hormesis), en el cual una concentración más baja estimula el crecimiento, mientras que concentraciones más altas son citotóxicas. Así, la secuencia natural de este estudio será la búsqueda y aislamiento de el/los componente(s) responsables por esta respuesta.