Caracterización de aislamientos VTEC O157:H7 y no-O157:H7 de Argentina mediante MLVA

BUSTAMANTE, ANA V.; SANSO, ANDREA M.; LUCCHESI, PAULA M. A.; PARMA ALBERTO E.

Tandil

Congreso; XXXVII CONGRESO ARGENTINO DE GENÉTICA; 2008

Sociedad Argentina de Genética

Escherichia coli verotoxigénico (VTEC) es un patógeno emergente capaz de causar severas enfermedades en humanos tales como colitis hemorrágica y síndrome urémico hemolítico (SUH). El  bovino es el principal reservorio y los alimentos de origen animal, la principal fuente de infección en humanos. En Argentina el serotipo más frecuentemente aislado de pacientes con SUH es el O157:H7 pero, a diferencia de otros países, también se detecta una alta proporción de serotipos no-O157:H7. El método de MLVA ha sido recientemente implementado en nuestro laboratorio para la tipificación específica de aislamientos O157:H7. Sin embargo, el objetivo del actual trabajo fue implementar un ensayo que sea genérico para VTEC, capaz de caracterizar aislamientos O157:H7 y no-O157:H7. Para ello se amplificaron por PCR 7 loci VNTR en 65 aislamientos provenientes de bovinos, pacientes y alimentos, pertenecientes a los serotipos O157:H7, O174:H21, O20:H19, O91:H21, O117:H7, O171:H2, O145:H- y O113:H21. Los amplímeros se visualizaron en geles desnaturalizantes de poliacrilamida, teñidos con sales de plata. La adaptación de este método permitió la tipificación de todos los aislamientos nativos de E. coli independientemente del serotipo. Los resultados indicaron una buena eficiencia en la amplificación de los 7 loci. Cinco de ellos se amplificaron en reacciones múltiples y dos, en reacciones simples. Todos los loci fueron polimórficos mostrando de 3 a 7 alelos, lo que resultó en múltiples perfiles genéticos. El ensayo de  MLVA implementado es útil para caracterizar tanto cepas O157:H7 como no-0157-H7 y refleja además la gran diversidad genética existente en las cepas VTEC autóctonas.