Participación de las proteínas argonauta involucradas en la metilación del ADN en la respuesta de plantas de Arabidopsis thaliana a la radiación UVB

SHERIDAN MARÍA LUJÁN; BOLOGNA, NICOLÁS; CASATI, PAULA

Congreso; V Reunión de Fotobiólogos Moleculares; 2020

Las plantas utilizan la luz solar para dirigir y regular procesos esenciales. Entre los componentes delespectro electromagnético que participan en estos procesos se encuentra la radiación UV-B (280-315 nm)que genera efectos perjudiciales sobre las plantas. Es por esto que las plantas han desarrollado múltiplesmecanismos de tolerancia y adaptación a la radiación UV-B. Entre los efectos causados por altas dosis deradiación UV-B en las plantas se observan el daño al ADN, a los lípidos y a las proteínas. Dos fenotiposcomunes de plantas luego de la exposición a UV-B son la inhibición del crecimiento de las hojas y de laelongación de la raíz primaria.Los ARNs pequeños son importantes reguladores de la expresión de genes. El silenciamiento génico seproduce en dos niveles, transcripcional (TGS) y postranscripcional (PTGS). Los siRNAs de 24 nt guían lametilación del ADN y la metilación de histonas para causar TGS. La metilación del ADN regula la expresióngénica, bloquea el movimiento de transposones y, en consecuencia, mantiene la integridad del genoma. Enlas plantas, la metilación del ADN canónico está mediada principalmente por complejos AGO4-siRNA quefuncionan en las rutas de metilación del ADN dependiente de ARN (RdDM). Los complejos AGO4-siRNAreclutan a la proteína metiltransferasa 2 (DRM2) que cataliza la metilación de novo del ADN objetivo. Enbase a esto, el objetivo del trabajo es dilucidar la participación de las proteínas argonauta involucradas enla metilación del ADN, en la respuesta de las plantas de Arabidopsis thaliana a la radiación ultravioleta-B ycomprender de qué modo las variaciones en el contexto de metilación del ADN influyen en esta respuesta,teniendo en cuenta la estrecha relación que existe entre el mantenimiento del genoma y el mantenimientodel metiloma.En el laboratorio, utilizando líneas que expresan la proteína AGO4 fusionadas a un reportero, verificamosuna disminución de la expresión de las proteínas posterior al tratamiento con radiación UV-B en la zonameristemática de las raíces primarias, sin visualizar cambios en la localización. Por otro lado, utilizamoslíneas mutantes ago4-5 y observamos que las raíces primarias se ven menos afectadas por un tratamientocon radiación UV-B que las líneas salvajes, sin embargo, las zonas meristemáticas de estas plantasmostraron cambios similares a los de plantas salvajes a nivel celular luego del tratamiento. A pesar de esto,las mutantes ago4-5 mostraron un mayor número de células meristemáticas muertas luego del tratamientocon UV-B que las plantas salvajes. En conjunto, estos resultados sugieren que AGO4, además de regular lametilación del ADN también participaría en respuestas frente al daño al ADN por UV-B.