Identificación de levaduras tolerantes a cobre y cromo aisladas de ambientes contaminados

VILLEGAS L; RIVADENEIRA J; DELGADO O D; AMOROSO M J; DE FIGUEROA L I C

Tucuman

Simposio; Simposio Internacional de Biotecnología; 2004

Cobre y cromo son micronutrientes esenciales requeridos para múltiples funciones bioquímicas y fisiológicas en prácticamente todos los organismos vivientes. En elevadas concentraciones estos metales pesados son tóxicos. La acumulación cobre y cromo en cantidades considerablemente altas ya sea en granos o vegetales cultivados en suelos contaminados, llegan al hombre ocasionando severas enfermedades. Los microorganismos como las levaduras pueden adaptarse rápidamente a las constantes fluctuaciones del medio incluyendo aquellas condiciones desfavorables para organismos más complejos, como lo son las elevadas concentraciones de metales. El principal objetivo del presente trabajo fue aislar levaduras capaces de tolerar condiciones desfavorables, específicamente metales pesados, y analizar su comportamiento en medios de cultivos con diferentes concentraciones de los mismos. Se trabajó con muestras de suelo contaminado con cobre extraídas de distintos lugares de un canal de drenaje de una mina y muestras de suelo contaminado con cromo obtenidas de piletones a cielo abierto de una curtiembre. Se seleccionaron los dos aislamientos más tolerantes a cobre y los dos más tolerantes a cromo. Estas fueron identificadas por técnicas moleculares secuenciando las regiones parciales de ADNr, NL-1 y NL-4 con la posterior confirmación por pruebas bioquímicas y fisiológicas. Se realizaron ensayos en medios de cultivo líquidos que contenían distintas concentraciones de los metales. Se utilizó el medio base nitrogenado para levaduras, YNB-glucosa, con el agregado de 0,1. 0,2 y 0,5 mM de Cu2+ y 0,7 y 1 mM de Cr6+. Las condiciones de cultivos fueron: 30ºC, 300 rpm, durante 80 h. Se sacaron muestras periódicamente y en ellas se analizó peso seco y concentración del metal residual. Estos estudios mostraron inhibición del crecimiento del 28-50% con 0,1mM; 40-50% con 0,2 mM y 50-60% con 0,5 mM de cobre, mientras en los ensayos realizados con cromo las inhibiciones fueron de 55-58% con 0,7 mM y de 78-86% con 1 mM. El porcentaje de remoción de los metales fue inversamente proporcional a la concentración del mismo en el medio de cultivo. El conocimiento del comportamiento de estos organismos para sobrevivir en presencia de metales y la capacidad de remoción de los mismos permitirá su utilización en beneficio del hombre en futuros procesos de biorremediación.