CINCO AÑOS DE EXPERIENCIA EN CONSERVACIÓN DE Streptococcus agalactiae: COMPARACIÓN DE DOS METODOLOGIAS ALTERNATIVAS.

LACZESKI M, NOVOSAK M, QUIROGA, VERGARA M

Corrientes

Congreso; II Congreso Bioquímico del NEA; 2014

Colegio de Bioquímicos de Corrientes y Chaco

Streptococcus agalactiae (SGB) constituye parte de la microbiota normal del tracto gastrointestinal y urogenital humano, adquiriendo relevancia en las gestantes a término, por la posibilidad de transmisión vertical al recién nacido, siendo una importante fuente de morbimortalidad perinatal. Actualmente la severa enfermedad neonatal puede prevenirse con un diagnóstico simple en la embarazada con edad gestacional entre 35-37 semanas que detecta SGB y la posterior instauración de la profilaxis intraparto (PIP), como únicas maneras, en ausencia aún de vacunas disponibles. Por ello además de optimizar los métodos diagnósticos enfocados a evitar la transmisión en el recién nacido y el estudio epidemiológico, existe la necesidad de conservar las cepas por tiempos prolongados para investigaciones futuras que incluyan búsqueda de genes asociados a la virulencia y resistencia a antibióticos, diseño de vacunas y nuevas tendencias en desarrollos biotecnológicos, así como su transporte a centros de referencia. Para estudiar y explotar estas potencialidades es conveniente resguardar a las bacterias en colecciones de cultivos, conservando ex situ, sus características fenotípicas y genotípicas y su viabilidad, para la cual se investigan en la actualidad diversas metodologías. Entre los métodos de conservación se encuentran los de corto plazo, mediano plazo y largo plazo. El objetivo de este trabajo fue comparar dos métodos de conservación considerados de mediano plazo: Agar tripticasa de soya al 7 a temperatura ambiente y oscuridad (ATS semisólido) y leche descremada al 20% a -80 (LD-80). Se estudiaron 150 cepas mantenidas en ambas condiciones. Para la siembra inicial se trabajo con cultivo puro en fase de crecimiento exponencial. Luego de 5 años las cepas se transfirieron a placas de agar sangre ovina al 5% y se evalúo su viabilidad, pureza, estabilidad antigénica (por test de aglutinación para grupo y serotipo) y genética por búsqueda de genes de virulencia bac, bca, hylB, lmb, características estas presentes al momento inicial de la prueba. Para ATS semisólido se recuperaron 15,33% de las cepas puras con recuento de colonias entre 100 -1.000 UFC/ml, 34,66% contaminadas y 50% no viables. Para LD-80 se recuperaron 98,66% de las cepas puras y con recuento mayor a 100.000 UFC/ml, 1,34% de cepas contaminadas y 0% de no viables. El 100 % de las cepas recuperadas, sin importar el medio de conservación utilizado, mantuvieron sus características fenotípicas y genotípicas. Se concluye que en un período de 5 años, existen diferencias significativas (p