EXPRESIÓN DE LA MOLÉCULA DE UNIÓN CADERINA N Y LA PROTEÍNA DE PLURIPOTENCIALIDAD OCT-4 DURANTE LA MIGRACIÓN Y COLONIZACIÓN DE LAS CÉLULAS GERMINALES PRIMORDIALES A LA CRESTA GONADAL EN COLUMBA LIVIA (AVES: COLUMBIFORMES)

OLEA GABRIELA; AGUIRRE MA. VICTORIA; LOMBARDO DANIEL

BUENOS AIRES

Jornada; VI JORNADAS DE JOVENES INVESTIGADORES DE LA UBA; 2016

UNIVERSIDAD DE BUENOS AIRES-FACULTAD DE CIENCIAS VETERINARIAS

En aves las células germinales primordiales (CGPs) migran desde una ubicación anterior a la fosita primitiva y el nodo de Hensen, hacia la cresta genital. El método de tinción clásicamente utilizado para distinguir las CGPs de las células somáticas fue la reacción histoquímica de PAS. En las últimas décadas se utilizó el gen Vasa homólogo (CVH) y se ha demostrado su expresión específica en la línea germinal aviar. Actualmente, otros inmunomarcadores han sido propuestos para la identificación de células de la línea germinal, tal es el caso de Oct-4 y caderina N. En este trabajo, se presenta el análisis inmunohistoquímico de la expresión diferencial de la molécula de unión caderina N y la proteína de pluripotencialidad Oct-4 en embriones de Columba livia durante la migración de las CGPs. Para ello se reveló en preparados histológicos de embriones de C. livia correspondientes a los estadios (E) 15 a E20 la expresión de caderina N y Oct-4, utilizando un anticuerpo anti N-cadherina (1 mg/ml) en una dilución de trabajo 1:100 y un anticuerpo anti Oct-4 a una dilución de trabajo estándar, ambos incubados por 60 min a 37ºC; y revelados según el protocolo indirecto de ?L-streptoavidina biotina?. La expresión de caderina N y Oct-4 en la línea germinal de C. livia nos permitió identificar claramente las CGPs en la membrana del saco vitelino a nivel del mesodermo esplácnico durante la migración hacia la cresta genital. La expresión de caderina N por las CGPs es necesaria para la interacción CGP-CGP y para su migración a través del sistema nervioso en desarrollo. Futuros estudios se focalizaran en el análisis de la expresión de otros marcadores de pluripotencialidad (Nanog) y genes de desarrollo temprano (BMP) con la finalidad de confirmar y ampliar los resultados obtenidos en el presente análisis, determinando la ruta migratoria, la colonización y el inicio de la diferenciación en la línea germinal, con el comienzo del desarrollo gonadal.