Exposición in vitro de células trofoblásticas JEG-3 al insecticida organofosforado clorpirifos, efecto sobre la inducción y actividad de enzimas metabólicas de fase I

SANCHEZ VICTORIA GUADALUPE; GOMEZ DIEGO SEBASTIAN; ESPINOZA, MARLON; PECHEN, ANA MARIA; GUIÑAZÚ NATALIA

Córdoba

Congreso; XXIV Jornadas Interdiciplinarias de Toxicología; 2016

Asociación Toxicológica Argentina

La placenta y el trofoblasto expresan gran variedad de enzimas metabólicas de fase I, como las familias citocromo P450 (CYP) y carboxilesterasa (CES). Estas enzimas son importantes para los procesos de detoxificación y/o bioactivación de xenobióticos, pudiendo modificar la toxicidad de los compuestos. Los xenobióticos además de ser biotransformados por estas enzimas serían capaces de modificar su expresión y actividad. El objetivo del presente trabajo fue estudiar si la exposición de células trofoblásticas JEG-3 a uno de los principios activos más utilizado en el país modula los niveles de transcripto y actividad de enzimas CYP y CES. Se expusieron células JEG-3 al plaguicida organofosforado clorpirifos (Cp) a las concentraciones 0,1; 1, 10 y 100 µM durante distintos tiempos de incubación. Se estudió la transcripción de CYP1A1, 1A2, 2B6, 2C19, 3A4, CES 1 y CES2 por RT-PCR convencional a 8 y 24 hs de exposición. Los resultados fueron corroborados por qPCR. La actividad enzimática CYP se determinó usando 7-etoxycoumarina (ECOD) a 24 y 48 hs por fluorescencia. La actividad de CES se determinó espectrofotométricamente luego de 4, 12 y 24 hs.Los resultados demostraron que Cp induce la expresión de transcripto de CYPs 2C19, 2B6 y 3A4 1,5 veces respecto del control luego de 8 hs de exposición sólo a 100 µM. En el caso de CES, no se observaron cambios en los niveles de expresión de mRNA. La actividad ECOD no registró cambios significativos, sin embargo a las 48 hs se ve una tendencia a la inhibición a altas concentraciones. CES muestra una clara inhibición a todas las concentraciones ensayadas a 24 hs de exposición.Estos resultados demuestran que JEG-3 expresa una maquinaria enzimática capaz de bioactivar a Cp a la forma oxón, inhibidora de B-esterasas y CES. Asimismo Cp sería capaz de regular la expresión de enzimas metabólicas CYP en este modelo. Estos resultados adquieren especial relevancia en escenarios de coexposición a xenobióticos y/o medicamentos durante el embarazo.