Activación por la vía clásica y producción de IL-12 por macrófagos esplénicos de una cepa de ratón resistente a la infección con T. cruzi y a la autoinmunidad cardíaca

NATALIA GUIÑAZÚ; ANDREA PELLEGRINI; MARÍA DEL PILAR AOKI; SUSANA GEA

Mar del Plata, Buenos Aires Argentina

Otro; XLVIII Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica y la LI Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2003

Sociedad Argentina de Inmunología

Previamente reportamos que macrófagos esplénicos (MÆ) de ratones BALB/c susceptibles a la infección, inmunizados con cruzipaína (Cz), presentan una elevada actividad de la enzima arginasa. Siendo los MÆ las principales células involucradas en el control o diseminación del parásito, el objetivo de este trabajo fue evaluar las vías de activación alternativa –arginasa- y clásica - óxido nítrico sintetasa inducible (iNOS)-, en MÆ provenientes de ratones C57BL/6 inmunizados con Cz.. También se analizaron las citoquinas IL-12, predominante de la vía clásica e IL-10. Ratones C57BL/6 de 8 semanas fueron inmunizados cada 14 días con 3 dosis i.d de 10 ug de Cz (Inmune, n=12) o 10 ug de ovalbumina (Control, n=12) más CFA. Los MÆ inmunes produjeron altos niveles de nitritos al ser estimulados con Cz o con LPS/IFNg- estimulante de iNOS (p=0,008 y p=0,02 respectivamente). Las células controles solo produjeron óxido nítrico en presencia de LPS/IFNg (p=0,001). Se observó una regulación positiva de iNOS en los lisados celulares de MÆ inmunes estimulados con Cz o LPS/IFNg por western blot (WB). Por el contrario, la activación de la enzima arginasa no fue detectada en MÆ inmunes estimulados con Cz. Estimulantes de arginasa, LPS o IL-4, incrementaron los niveles de urea, producto de la arginasa (p<0,05) y la arginasa I fue regulada positivamente. Al ensayar las citoquinas IL-12 e IL-10 en sobrenadantes de MÆ inmunes estimulados con Cz, se detectó un aumento de IL-12 (p< 0,001) mientras que los niveles de IL-10 no mostraron diferencias respecto de los basales estimulados con medio. En conclusión, la inmunización de C57BL/6 con Cz induce la producción de IL-12 y la activación de MÆ esplénicos por vía clásica, la cual es facilitada por altos niveles de IFNg previamente demostrados en este modelo experimental.