MECANISMOS MOLECULARES DE PROTECCIÓN DE LA ESTIMULACIÓN VAGAL PRE-ISQUÉMICA Y POST-ISQUÉMICA EN LA INJURIA POR ISQUEMIA Y REPERFUSIÓN MIOCÁRDICA EN RATONES.

BRUNO BUCHHOLZ; JAZMÍN KELLY; MARINA C MUÑOZ; EDUARDO BERNATENÉ; NAHUEL MÉNDEZ DIODATI; DANIEL GÓNZALEZ MAGLIO; FERNANDO P DOMINICI; RICARDO GELPI

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; LXI Reunión de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2016

SAIC

Objetivos:Previamente demostramos que la estimulación vagal (EV)reduce el tamaño de infarto tanto cuando se aplica antes de la isquemia como enla reperfusión. Sin embargo, no se conocen los mecanismosmoleculares involucrados en la misma. Por lo tanto, el objetivo fue estudiarlas vías moleculares implicadas en la protección de la EV pre-isquémica y de laEV en la reperfusión.Materialesy Métodos:En ratones FVB se realizóuna isquemia miocárdica regional de 30 min y 2 h dereperfusión sin EV (I/R, n=8); con EV pre-isquémica por 10 min (EVp, n=8); conEV pre-isquémica y bloqueo muscarínico con atropina (EVp+Atr, n=8); con EV pre-isquémicay bloqueo nicotínico alfa-7 con metilicaconitina (MLA) (EVp+MLA, n=8). También,se estudiaron los efectos de la EV en los primeros 10 min de la reperfusión (EVr,n=9); con atropina (EVr+Atr, n=8); con MLA (EVr+MLA, n=8); y con el bloqueantede la JAK2, AG490 (EVr+AG, n=6). Para evaluar la participación de la vía vagal antiinflamatoriaesplénica en la protección, se realizó una EVr con sección vagal abdominaldorsal (EVr+s-VD, n=7) y esplenectomía (EVr+Esp, n=7). Se midió el área deriesgo con Azul de Evans y el infarto con TTC. Se determinó los niveles de IL-6por ELISA en el miocardio y el plasma. Se repitieron algunos grupos, a los quese reperfundieron solamente por 15 minutos, para tomar muestras de ventrículoizquierdo para realizar Western blot. Para el análisis estadístico de losdatos, se realizó un ANOVA de una vía seguido de la prueba de Bonferroni.Resultados:La EV redujo el tamaño deinfarto tanto cuando se aplicó previo a la isquemia(43,8±2,9%) como en lareperfusión(40,3±2,3%) respecto al grupo I/R (59,3±2,5%)(p<0,05). Laprotección de la EV previo a la isquemia fue bloqueada por la atropina(55,9±1,6%)(p<0,05), pero no por el MLA (43,8±2,8%). La protección de la EVen la reperfusión no fue bloqueada por la atropina (39,3±2,0%), pero si por elMLA (59,6±2,5%)(p<0,05) y por el AG490 (52,7±2,2%)(p<0,05). Ni ladenervación del bazo, ni la esplenectomía revirtieron la protección de la EV enla reperfusión (41,9±3,6% y 42,4±2,5%; respectivamente). La EVr no revirtió elaumento de IL-6 que se produce en la injuria por isquemia/reperfusión. En elgrupo EVp hubo un aumento de la fosforilación de Akt respecto al grupo Controly al grupo Sham (4,25±0,64 vs. 2,15±0,17 vs. 0,80±0,13; respectivamente)(p<0,05),que se revierte con la administración de atropina (1,13±0,34)(p<0,05). Estemismo aumento en la fosforilación se observó en GSK-3β (4,65±0,52 vs. 2,91±0,36vs. 1,05±0,05; respectivamente)(p<0,05), nuevamente perdiéndose con laatropina (1,44±0,33)(p<0,05). Por otro lado, no hubo diferencias significativasen la fosforilación de ERK1/2, JAK2 y STAT3. En el grupo EVr, se observó un aumento,sin ser significativo, de la fosforilación de JAK2 respecto al grupo Control(2,36±0,40 vs. 1,64±0,2; respectivamente). Por otro lado, no se evidenciarondiferencias significativas en el grupo EVr ni EVr+MLA respecto al grupo Controlen cuanto a la fosforilación de Akt, GSK-3β, ERK1/2, ni STAT3.Conclusiones:En el ratón, la EV previa a la isquemia reduce el tamañodel infarto mediante la activación colinérgica muscarínica de la vía Akt/GSK-3β. En cambio,la EV en la reperfusión reduce el tamaño del infarto, de manera similar a la EVpre-isquémica, pero por activación colinérgica nicotínica alfa-7de la vía JAK2 e independientemente de la respuesta antiinflamatoria sistémicay local del miocardio.