El swelling hipotónico promueve un aumento de óxido nítrico en miocitos cardiacos de rata: El impacto en el swelling induce un efecto inotrópico negativo

LUIS GONANO, MALENA MORELL, MARTIN VILA PETROFF

Rosario

Congreso; Congreso Federación Argentina de Cardiologia; 2013

Federación Argentina de Cardiologia

Los cardiomiocitos sufren hinchamiento osmótico en diversas situaciones patológicas. En particular, este contribuye a los efectos deletéreos de la isquemia y reperfusión al inducir un efecto inotrópico negativo (EIN). Previamente hemos demostrado que el estiramiento axial de los miocitos promueve la liberación de oxido nítrico (NO). Sin embargo, si el hinchamiento osmótico también promueve liberación de NO y si tiene algún impacto sobre el EIN inducido por hinchamiento osmótico no ha sido aún examinado. En miocitos cardiacos de ratas wistar, incubados con el sensor fluorescente de NO, DAF-FM, observamos que bajar la osmolaridad de la solución de perfusión desde 300 mOsm a 217 mOsm aumentó el volumen celular (15±1%), redujo la amplitud de contracción (16±5% a los 15 minutos del shock osmótico) y aumentó significativamente la señal del DAF-FM (17±3%). Cuando la solución hipotónica se administró en presencia de 2.5 mM del inhibidor de la NO sintetasa L-Name, las células se hincharon normalmente pero no aumentó la señal de DAF-FM (2±2%). Por otra parte, el EIN inducido por hinchamiento se encontró exacerbado en presencia de L-Name (44±7%). Adicionalmente, usando el inhibidor de la polimerización de los microtúbulos (colchicina 10 µM), evaluamos la participación del citoesqueleto como un mecanotransductor necesario para la liberación de NO inducida por hinchamiento. La presencia de colchicina previno el aumento de la señal de DAF-FM inducida por hinchamiento (4±3%), indicando que la integridad del citoesqueleto es necesaria para la liberación de NO. Un hallazgo novedoso surgido al continuar la perfusión hipotónica más allá de los 15 minutos ha sido la recuperación contráctil hasta valores previos al stress osmótico, que comienza a los 25 minutos y no ocurre cuando está inhibida la producción de NO. Tomados en conjunto los resultados demuestran en nuevo mecanismo para la liberación de NO en miocitos cardiacos sometidos a stress hipotónico. La liberación de NO podría ser relevante en el contexto de I/R donde podría cumplir un rol cardioprotector al reducir el EIN inducido por hinchamiento osmótico.