El plaguicida organofosforado clorpirifos inhibe la proliferación por distintos caminos de señalización en celulas de melanoma con diferente grado de diferenciación

VENTURA, C; VENTURINO A; RANDI, A; NÚÑEZ, M; COCCA, C

Mar del Plata

Congreso; LIX Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC) y LXII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología (SAI); 2014

SAIC-SAI

En presentaciones previas demostramos que el insecticida clorpirifos (CPF) disminuye la proliferación celular mediante un aumento de las especies reactivas del oxígeno (ERO) en líneas celulares derivadas de melanoma con diferente grado de diferenciación. OBJETIVO: Estudiar las participación de las MAPKs y del H2O2 en esa inhibición. METODOLOGIA: En las líneas WM35 y M1/15 derivadas de melanoma expuestas a CPF (0,05 - 50 μM), evaluamos:la proliferación por recuento clonogénico e incorporación de Bromo-deoxiuridina (BrdU), las ERO por citometría de flujo con la sonda DCF-2DA y la fosforilación de ERK1/2 y p38 por Western blot en presencia y ausencia de sus inhibidores específicos. El CPF 50 μM inhibió la clonogenicidad en un 45,9 ± 17,2% en WM35 (p<0,05) y 44,9 ± 8,7% en M1/15 (p<0,01). Después de 24 h, el CPF disminuyó la incorporación de BrdU en un 25,2 ± 5,7% respectoal control (p<0,05) en la línea M1/15 e incrementó los niveles de ERO en un 76,0 ± 23,1% en WM35 (p<0,01) y 59,3 ± 13,4% en M1/15 (p<0,05). La inhibición de la clonogenicidad fue revirtida por el agregado de catalasa. En ambas líneas celulares, el CPF 50 incrementó la forforilación de p38 a tiempos cortos. Esta fosforilación se mantuvo hasta las 6 hs en las células M1/15 (p<0,001) y la inhibición de la clonogenicidad fue revirtida por agregado de un inhibidor de p38. En WM35, la inhibición de la clonogenicidad resultó independiente de p38 y observamos una disminución en la fosforilación de ERK1/2 luego de 24 hs de exposición a CPF 50 (49,7 ± 10,2%). CONCLUSION: El CPF inhibe la proliferación en las células de melanoma. Esta acción es mediada por H2O2 a través de caminos de señalización diferentes en las líneas con diferentegrado de diferenciación. En la línea M1/15 es dependiente de p38 y en la línea WM35, más diferenciada, podría asociarse a una disminución de la actividad de ERK1/2.