Caracterización de sitios de unión de la histamina en tumores mamarios inducidos en ratas

DAVIO CA; RIVERA, E; BERGOC R.M.; VENTURINO A; CRICCO G; LORENZO P; SCOLNIK AJ; CARO RA

Buenos Aires

Congreso; Reunión Científica Anual. Academia Argentina de Farmacia y Bioquímica; 1987

Academia Argentina de Farmacia y Bioquímica

Desde hace aros, venimos efectuando estudios que parecen indicar la existencia de una relaci6n entre la histamina y sus metabolitos y el crecimiento tumoral. Por otro lado, otros autores observaron que el tratamiento con antagonistas H2 en diferentes tumores experimentales, muestran una supresión de la actividad mit6tica, del crecimiento tumoral, de la aparición de metástasis y aumento de la sobrevida del animal portador. Los antagonistas H1 producen un efecto inverso. Se plantea que estos efectos serian debidos a que la histamina sintetizada" de novo " por el tumor, activaría los receptores H2  y H1 presentes en los linfocitos T supresores y acti­vadores. Sin embargo no se sabe si hay un efecto directo de antagonistas y agonistas Hl y H2 sobre la célula tumoral a través de receptores específicos en la membrana celular. Por esta razón el objetivo del presente trabajo consiste en el estudio de receptores de histamina en el tejido tumoral, su caracterización y el papel que desempeña en el desarrollo del mismo, Para esto se utili­za como modelo experimental tumores inducidos con N-nitroso  N-metil urea (NMU), en ratas Sprague-Dawley. Se utiliza pulm6n como tejido de referencia. Los estudios de unión se efectuaron, utilizando como ligando 3H-histamina la fuente de receptores más adecuada result6 ser fracci6n purificada de membranas. - La cinética de unión ligando-receptor en el caso de la histamina es rápida, los ensayos se efectuaron por incubación durante 15 minutos a 30 °C. Por el tipo de cinética la separaci6n del unido-libre debe ser lo más rápida posible siendo el método más eficiente la filtraci6n por va­cío con filtros de papel Whatman GF-B Y lavado con buffer frío. En la determinación de la uni6n inespecífica se utiliza histamina fría en una concentración de 100 veces el valor de la constante de disociación (Kd). Las mediciones de radiactividad se efectuaron en un contador de centelleo líquido determinándose actividad absoluta por el método de relación de canales. El análisis de los resultados arroj6 los siguientes datos:                                   Kd =(19 +- 2 )nM            nHill= 1,05 ± 0,08 Estos valores coinciden con los preexistentes en la bibliografía. En la actualidad se está trabajando sobre tejido tumoral, habiéndo­se encontrado la existencia de uni6n específica. Estudios posteriores permitirán determinar Kd, B máx., diferenciación en tipos de receptores (Hl y H2), y búsqueda de respuesta biol6gica que confirme que realmente estamos en presencia de receptores.